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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决？
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fly6886

木虫 (小有名气)

[求助] waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决？ 已有9人参与

波长226，A水-乙腈-TFA(1900:100:1)；B乙腈-水-TFA(1900:100:1)；1-30min基线规律波动，该如何解决，色谱图和梯度设置如图

waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决？


waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决？-1


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曾经拥有的，不要忘记；不能得到的，更要珍惜；属于自己的，不要放弃；已经失去的，留作回忆。
1楼 2015-12-07 19:13:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fly6886: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-12-08 09:13:46
226nm，背景吸收容易造成影响。可以尝试改用默克的试剂，现配的TFA（易氧化），国内好一点的无机盐，减低可能产生的干扰。
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守候在风中的宁静。
8楼2015-12-08 08:44:22
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gybbyg

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
fly6886: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-12-08 09:12:43
230本来就有吸收干扰，所以只有微调到稍微平，不会完全平，要么换流动相体系，换进口溶剂，换无机盐厂家试试，我们经常碰到

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5楼2015-12-08 05:10:22
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普通回帖

thecoldest

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1%的流动相比例，泵输液速度可能会不稳定

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努力工作！
2楼2015-12-07 20:06:52
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gybbyg

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10%起始看看，这个多调几个试试，不难应该

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3楼2015-12-07 22:06:42
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fly6886

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gybbyg at 2015-12-07 22:06:42
10%起始看看，这个多调几个试试，不难应该

梯度是根据杂质分离情况最后定下的，现在问题是由于基线太差，限度浓度（0.1%）已接近定量限，无法做线性与范围等验证试验，有没有好的方法，不调梯度，把基线调平些？在300nm波长时基线还是挺好的，到230nm附近就不行了
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曾经拥有的，不要忘记；不能得到的，更要珍惜；属于自己的，不要放弃；已经失去的，留作回忆。
4楼2015-12-07 22:36:54
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fly6886: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-12-08 09:13:12
你前30分钟是个直线梯度，图上6分钟到十六分钟截图是这段梯度。这是正常的，因为你的流动相比例一直在变，控制下环境温度，柱子多空走几次，这个噪音会小点，去掉是不可能的，要不就还个梯度或换流动相吧。

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我是超级天后：天天努力，不落人后！
6楼2015-12-08 08:21:02
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wangluo335

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种梯度变化率（B相）想把基线调平很难，最多用进口的试剂可能会稍微好一点
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7楼2015-12-08 08:35:41
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cenlm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
按我的意思，你换一个好一点的TFA应该就好了
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加油
9楼2015-12-08 08:48:38
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fly6886

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gybbyg at 2015-12-08 05:10:22
230本来就有吸收干扰，所以只有微调到稍微平，不会完全平，要么换流动相体系，换进口溶剂，换无机盐厂家试试，我们经常碰到

试剂乙腈是默克的，TFA是百灵威的，只有水是自制的，实在不知怎么弄了

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曾经拥有的，不要忘记；不能得到的，更要珍惜；属于自己的，不要放弃；已经失去的，留作回忆。
10楼2015-12-08 09:09:20
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