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fly6886

木虫 (小有名气)

[求助] waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决?已有9人参与

波长226,A水-乙腈-TFA(1900:100:1);B乙腈-水-TFA(1900:100:1);1-30min基线规律波动,该如何解决,色谱图和梯度设置如图

waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决?


waters HPLC梯度基线波动太大怎么解决?-1


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曾经拥有的,不要忘记;不能得到的,更要珍惜;属于自己的,不要放弃;已经失去的,留作回忆。
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fly6886: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-12-08 09:13:46
226nm,背景吸收容易造成影响。可以尝试改用默克的试剂,现配的TFA(易氧化),国内好一点的无机盐,减低可能产生的干扰。
守候在风中的宁静。
8楼2015-12-08 08:44:22
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gybbyg

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
fly6886: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-12-08 09:12:43
230本来就有吸收干扰,所以只有微调到稍微平,不会完全平,要么换流动相体系,换进口溶剂,换无机盐厂家试试,我们经常碰到

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5楼2015-12-08 05:10:22
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thecoldest

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1%的流动相比例,泵输液速度可能会不稳定

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努力工作!
2楼2015-12-07 20:06:52
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gybbyg

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10%起始看看,这个多调几个试试,不难应该

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3楼2015-12-07 22:06:42
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fly6886

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gybbyg at 2015-12-07 22:06:42
10%起始看看,这个多调几个试试,不难应该

梯度是根据杂质分离情况最后定下的,现在问题是由于基线太差,限度浓度(0.1%)已接近定量限,无法做线性与范围等验证试验,有没有好的方法,不调梯度,把基线调平些?在300nm波长时基线还是挺好的,到230nm附近就不行了
曾经拥有的,不要忘记;不能得到的,更要珍惜;属于自己的,不要放弃;已经失去的,留作回忆。
4楼2015-12-07 22:36:54
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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fly6886: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-12-08 09:13:12
你前30分钟是个直线梯度,图上6分钟到十六分钟截图是这段梯度。这是正常的,因为你的流动相比例一直在变,控制下环境温度,柱子多空走几次,这个噪音会小点,去掉是不可能的,要不就还个梯度或换流动相吧。

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我是超级天后:天天努力,不落人后!
6楼2015-12-08 08:21:02
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wangluo335

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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这种梯度变化率(B相)想把基线调平很难,最多用进口的试剂可能会稍微好一点
7楼2015-12-08 08:35:41
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cenlm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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按我的意思,你换一个好一点的TFA应该就好了
加油
9楼2015-12-08 08:48:38
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fly6886

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by gybbyg at 2015-12-08 05:10:22
230本来就有吸收干扰,所以只有微调到稍微平,不会完全平,要么换流动相体系,换进口溶剂,换无机盐厂家试试,我们经常碰到

试剂乙腈是默克的,TFA是百灵威的,只有水是自制的,实在不知怎么弄了

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曾经拥有的,不要忘记;不能得到的,更要珍惜;属于自己的,不要放弃;已经失去的,留作回忆。
10楼2015-12-08 09:09:20
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