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Magic_Bingo

木虫 (正式写手)

[求助] 喜树碱 载药胶束 激光共聚焦成像 细胞染色问题

在做传统的抗癌载药聚合物胶束,常用的模型药物是阿霉素,它自带荧光,做激光共聚焦成像时,样品不需要染色(实验室一直用的都是此模型药物),我最近换了一个新的药物,是喜树碱,它分子结构中没有自带荧光,胶束在包载喜树碱后,载药胶束做激光共聚焦实验时,如何能让其有荧光呢(我只是大概知道需要染色,但具体怎么操作不知道),查阅文献都是很粗略的描述,有没有做过的虫子能给个详细的建议呢?如果能有方案更好!有经验的前辈请多多指教!!

[ Last edited by markar on 2015-12-7 at 21:57 ]
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PISR

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Magic_Bingo: 金币+20, ★★★很有帮助, 经验之谈...有帮助.... 2015-12-07 22:16:15
markar: 金币+1, 鼓励一下! 2015-12-14 15:48:56
喜树碱本身有蓝色荧光,做激光共聚焦时用408nm激发
2楼2015-12-07 20:08:54
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Magic_Bingo

木虫 (正式写手)

送红花一朵
是么,我再去找找文献求证一下,多谢你的指导……

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-07 21:35:57
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zjchenbme

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Magic_Bingo: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-12-08 20:24:31
markar: 金币+1, 鼓励一下! 2015-12-14 15:49:18
喜树碱可以发荧光,最大激发波长365-370nm,最大发射波长为430,呈蓝光.喜树碱激光共聚焦可以用PI染细胞核(红色)加以区分,用365激发喜树碱后呈蓝色。另补充:喜树碱408nm不能被激发,将看不到蓝光。

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4楼2015-12-08 12:47:50
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ybrjack

铁虫 (正式写手)

为什么一定要观察荧光呢?有治疗效果才是核心啊

发自小木虫IOS客户端
5楼2015-12-08 13:19:49
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Magic_Bingo

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by zjchenbme at 2015-12-08 12:47:50
喜树碱可以发荧光,最大激发波长365-370nm,最大发射波长为430,呈蓝光.喜树碱激光共聚焦可以用PI染细胞核(红色)加以区分,用365激发喜树碱后呈蓝色。另补充:喜树碱408nm不能被激发,将看不到蓝光。

嗯,受教了,我们做的阿霉素在做共聚焦的时候,用的是这个染料,“hochest 33342染色15 min”,是不是把这个染料相对应的换一下就可以了,其他操作步骤是一样的对吧....
6楼2015-12-08 20:24:15
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zjchenbme

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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Magic_Bingo: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-12-09 08:59:51
引用回帖:
6楼: Originally posted by Magic_Bingo at 2015-12-08 20:24:15
嗯,受教了,我们做的阿霉素在做共聚焦的时候,用的是这个染料,“hochest 33342染色15 min”,是不是把这个染料相对应的换一下就可以了,其他操作步骤是一样的对吧.......

差不多是这个意思,你说的那个染料是发蓝色荧光染细胞核,阿霉素发红色荧光,这样红蓝就可以区分嘛。不过你要注意染细胞的时候需要细胞什么状态,死的还是活得,因为不同的染料染法不一样。貌似PI是染死细胞,这样你就需要将细胞固定后再染。

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7楼2015-12-08 23:24:19
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Magic_Bingo

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by zjchenbme at 2015-12-08 23:24:19
差不多是这个意思,你说的那个染料是发蓝色荧光染细胞核,阿霉素发红色荧光,这样红蓝就可以区分嘛。不过你要注意染细胞的时候需要细胞什么状态,死的还是活得,因为不同的染料染法不一样。貌似PI是染死细胞,这样 ...

我们做阿霉素的时候也都是用多聚甲醛固定细胞,原理不懂,这可能就是你说的固定细胞,测的是死细胞吧...多谢指教!!
8楼2015-12-09 08:59:35
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