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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

[求助] 急急急,在线等,关于蛋白体外活性检测的问题

蛋白体外活性检测的方法有哪些,具体操作是什么,原理是什么,谢谢,如有帮助发金币
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-07 19:09:39
体外的蛋白活力检测主要分为结合和功能两方面。

结合:就是蛋白和目的靶点之间的结合能力的强弱,这个其实是测量可逆反应过程中的蛋白和目的靶点的解离平衡常数。一般会用同位素检测或者ELISA进行,你可以搜索Li ...

蛋白和目的靶点结合活性的强弱,通过同位素标记可以得到蛋白活性强弱,我想知道是什么原理啊?或者怎么做?
然后关于蛋白功能活性的强弱,是蛋白和靶点结合后,引起了细胞体内的信号应答,这样的一个过程,可以通过什么实验验证呢,网上关于蛋白活性的检测,有MTT和结晶紫染色法,这两种方法是检测活细胞的数量的吧?对蛋白的活性又怎么能检测出来呢?期待您的回答~
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4楼2015-12-09 14:17:46
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
18761615793: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 很有帮助 2015-12-08 10:06:26
体外的蛋白活力检测主要分为结合和功能两方面。

结合:就是蛋白和目的靶点之间的结合能力的强弱,这个其实是测量可逆反应过程中的蛋白和目的靶点的解离平衡常数。一般会用同位素检测或者ELISA进行,你可以搜索Ligand-Binding Assay,能够找到不少资料。

功能是建立在结合的基础之上的,功能学实验主要集中在细胞水平,蛋白和目的靶点结合后,引起了细胞体内的信号应答,使细胞的某些功能得到增强或者抑制等.比如ADCC,抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity )是指表达IgGFc受体的NK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等,通过与已结合在病毒感染细胞和肿瘤细胞等靶细胞表面的IgG抗体的Fc段结合,而杀伤这些靶细胞的作用。IgG抗体可介导这些细胞发挥ADCC作用,其中NK细胞是能发挥ADCC作用的主要细胞。在抗体介导的ADCC作用的发生过程中,抗体只能与靶细胞上的相应抗原表位特异性结合,而NK细胞等效应细胞可杀伤任何已与抗体结合的靶细胞,故抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,NK细胞等对靶细胞的杀伤作用是非特异性的。

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2楼2015-12-07 19:09:39
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-07 19:09:39
体外的蛋白活力检测主要分为结合和功能两方面。

结合:就是蛋白和目的靶点之间的结合能力的强弱,这个其实是测量可逆反应过程中的蛋白和目的靶点的解离平衡常数。一般会用同位素检测或者ELISA进行,你可以搜索Li ...

结合的部分说的很明白,关于功能的解说也算是明白,比如后面的举例不太能看懂啊,大神还有其他一些想说的吗,关于蛋白活性检测方面的都可以,或者一些资料也可以
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3楼2015-12-08 10:08:38
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-07 19:09:39
体外的蛋白活力检测主要分为结合和功能两方面。

结合:就是蛋白和目的靶点之间的结合能力的强弱,这个其实是测量可逆反应过程中的蛋白和目的靶点的解离平衡常数。一般会用同位素检测或者ELISA进行,你可以搜索Li ...

还有,我想知道的是蛋白体外活性检测和你说的蛋白体外活力检测是一个概念吗,刚接触这方面,不懂啊,多多帮助,谢谢~
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5楼2015-12-09 14:19:29
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