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大咖小蛊

银虫 (小有名气)

[求助] 枯草芽孢杆菌在1吨发酵罐中生产的正常指标如何 已有4人参与

最近做的发酵罐菌制剂出现问题:发酵罐菌液活菌数检测结果比摇瓶种子液差不多;有时更低。其次,摇瓶种子液发酵过程中产酸:PH也是有7到6.5的,但是接种至发酵罐中培养,培养过程中PH是7升到8.5了。摇瓶菌液和发酵罐菌液镜检菌种形态基本差不多,革兰氏染色阳性。形态为短杆状或孢子状。200的摇瓶培养24小时,再接1吨发酵罐培养32小时。温度在35-40,培养基为一般的碳源和氮源的粗料培养,关键是以前能做到摇瓶菌数的10倍多吧,噬菌体也怀疑过,平板检测过但是不知道如何判断。后来消过毒,但是之后菌数还是做不起来,也做了复壮筛选但是酪蛋白圈看不出来。摇瓶培养的菌数有5亿左右吧。希望懂的做过的同行能帮我分析,指点迷津,新币不多,不要见怪!
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大咖小蛊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 陈_劼_翔 at 2015-12-11 18:51:37
培养基组分和水质以及灭菌的蒸汽都确认无变化吗?那菌种出问题的可能性大些,枯草染噬菌体少见。你们有观测整个发酵过程吗?有没更具体的数据差异?就只有一个发酵结束的菌浓数据吗?...

我们现在也是怀疑菌种的问题,后续会做相关的复壮实验看看。整个发酵过程我们现在中途取样检测,目前只检测发酵结束菌数。我也感觉不会染噬菌体的,这段时间一直在做,菌数还是不高,但是PH又回落到中性,试纸显色为6.5-7.0
16楼2015-12-21 14:20:22
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bigboy2050

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
大咖小蛊: 金币+2, 有帮助 2015-12-22 11:46:42
可能是温和噬菌体,平时环境中活菌排放多吗?
职业无分贵贱,做事要有格调
2楼2015-12-07 21:22:55
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红色绯鱼

新虫 (初入文坛)

请教一下你,枯草杆菌摇床活化时的转速和时间多少的?是过夜12h培养吗?

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-07 23:27:33
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大咖小蛊

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bigboy2050 at 2015-12-07 21:22:55
可能是温和噬菌体,平时环境中活菌排放多吗?

每天早上排出菌液,排料口再进行蒸汽消毒10分钟左右。
4楼2015-12-08 08:43:46
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