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大咖小蛊

银虫 (小有名气)

[求助] 枯草芽孢杆菌在1吨发酵罐中生产的正常指标如何 已有4人参与

最近做的发酵罐菌制剂出现问题:发酵罐菌液活菌数检测结果比摇瓶种子液差不多;有时更低。其次,摇瓶种子液发酵过程中产酸:PH也是有7到6.5的,但是接种至发酵罐中培养,培养过程中PH是7升到8.5了。摇瓶菌液和发酵罐菌液镜检菌种形态基本差不多,革兰氏染色阳性。形态为短杆状或孢子状。200的摇瓶培养24小时,再接1吨发酵罐培养32小时。温度在35-40,培养基为一般的碳源和氮源的粗料培养,关键是以前能做到摇瓶菌数的10倍多吧,噬菌体也怀疑过,平板检测过但是不知道如何判断。后来消过毒,但是之后菌数还是做不起来,也做了复壮筛选但是酪蛋白圈看不出来。摇瓶培养的菌数有5亿左右吧。希望懂的做过的同行能帮我分析,指点迷津,新币不多,不要见怪!
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陈_劼_翔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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大咖小蛊: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-12-22 11:47:12
摇瓶通气效果不好产酸不奇怪啊。根据你的描述,你摇瓶时间太长了,菌都衰老了。但这应该不是发酵效果变差的关键。如果你们确认任何外在条件都没变的话,发酵效果突然变差就应该是菌种的原因。找到以前保藏的菌种重新活化吧。
这是签名~
7楼2015-12-08 12:49:25
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陈_劼_翔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
大咖小蛊: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-12-22 11:49:31
引用回帖:
9楼: Originally posted by 大咖小蛊 at 2015-12-09 15:03:35
那枯草芽孢杆菌正常培养是产酸吗?我问过老师说是产酸啊。但是也有人上发酵罐做PH会升高,我就是想知道PH的正常变化时怎么样的。摇瓶培养时间确实长了些,会缩短摇瓶培养时间再上罐试试的。菌种也会同步的活化复壮 ...

ph变化和很多因素相关的,菌种特性是一方面,培养基和培养条件也是关键。你可以自己去查资料。例如好氧发酵如果缺氧的话可能会累积有机酸。或是前期菌体生长过快,即便氧气充足,有氧呼吸也是跟不上的(受柠檬酸循环速率的限制)。如果培养基中氮源较多,后期碳源不足,会产氨,ph就一直升高咯。。。。。一般加了葡萄糖淀粉这些东西的培养基发酵ph会是先降再升。具体情况具体分析
这是签名~
11楼2015-12-10 12:43:55
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陈_劼_翔

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 大咖小蛊 at 2015-12-11 09:17:53
嗯,也是有可能的,摇瓶可能存在氧气不足的情况。发酵罐氧气比较足,后期可能营养物质跟不上。但是,以前做的菌数和现在做的相差有10倍左右啊,其他的培养条件和配方都不变的,所以我们怀疑要么染噬菌体要么菌种退 ...

培养基组分和水质以及灭菌的蒸汽都确认无变化吗?那菌种出问题的可能性大些,枯草染噬菌体少见。你们有观测整个发酵过程吗?有没更具体的数据差异?就只有一个发酵结束的菌浓数据吗?
这是签名~
13楼2015-12-11 18:51:37
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