24小时热门版块排行榜    

查看: 10197  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

纳样飘发

金虫 (小有名气)

[交流] 关于甘油冷冻保存菌种 大家是怎么做的?

我大概查了一下 目前在甘油冷冻离心貌似没有一个标准的做法?我查到的情况如下
(1)甘油浓度:在10%-80%的都有
(2)菌的形式
①以前跟我们实验室合作的一个工程师教给我们的做法是把纯菌划斜面,菌长好后直接把灭菌20%甘油2mL倒在试管里,用接菌环把菌刮到甘油里,把甘油倒在甘油管里。
②隔壁实验室的做法是菌种液体培养,将液体培养菌液离心,去掉液体,留下沉淀,加入新培养基再加入同体积的50%甘油,重悬,倒在甘油管里。
③还了解到一种做法是液体培养的培养液直接加入同体积甘油,然后混匀倒在甘油管里。
(3)保存
有的说直接放在-80℃冰箱里;有的说先放到-20℃冰箱预冷,再转移到-80℃冰箱里;还有的说只在-20℃冰箱里保存即可。
(4)保存时间
有的说2-4个月、有的说一两年、有的说十年。。
(5)菌种活化
甘油管保存的菌种活化使用,有的说在37℃水浴快速解冻然后接培养液;有的说要在冰块上缓慢解冻然后接培养液。

那么请问大家 大家都是怎么操作的、、甘油管冷冻保存有标准操作规范么?

我觉得操作上分歧这么大说明这些中方法都是可以的。。。。
回复此楼
青岛明月海藻集团,海藻酸盐、海藻酸丙二醇酯PGA.微信:BMSG_Tienjen
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明刃

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
纳样飘发: 金币+2 2015-12-03 17:42:22
我当时做大肠杆菌的冷冻甘油保存:
   保存时有两种方法:1 取对数期的菌液,加入50%的灭过菌的甘油溶液,至甘油终浓度为10%--25%;2 先用新鲜培养基稀释灭过菌的50%的甘油溶液,至甘油浓度为10--25%,然后直接把平板上长的菌落挑起来,重悬到保存液中。
然后直接放到-80度冰箱,一般保存一年左右吧。
7楼2015-12-03 14:52:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

纳样飘发

金虫 (小有名气)

2楼2015-12-02 22:16:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SorryJ

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
纳样飘发: 金币+1 2015-12-03 09:25:12
我们实验室是30%已灭菌的甘油,跟菌液1:1混合,液氮速冻后,-80°保存。以前我用过隔壁实验室的60%的甘油,混合比例改一下就可以了。

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-02 23:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

看见自己

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
纳样飘发: 金币+1 2015-12-03 09:25:06
菌液与20%甘油等比例混合,零下20度保存一年没问题。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-12-02 23:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 6/300 2026-08-29 18:10 by manplx
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-29 18:04 by 4FFAWE8HcgUD
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 17:31 by 4FFAWE8HcgUD
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 17:30 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 面上意见出来了 +6 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 12/600 2026-08-29 17:20 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +14 晴天加油 2026-08-26 15/750 2026-08-29 11:06 by biily
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见