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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 洋葱花药剥取技巧 百合科也行
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scwer

新虫 (初入文坛)

[求助] 洋葱花药剥取技巧 百合科也行 已有1人参与

我要做的是研究洋葱雄性不育，通过对不育系和可育系进行转录组测序来找出雄性不育相关基因。材料是不育和可育的花药（懂的人知道拨这个有多麻烦）。转录组测序要求样品最少0.5g，但剥取下来的洋葱花药特别容易失活，导致里面RNA降解十分严重，从而无法进行转录组测序。本人在这里恳求一个剥取洋葱花药快速且不易失活的方法，因为材料太难弄到，一次不成功还要再等一年，所以恳求大神指点！！！
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where there is a will,there is a way
1楼 2015-12-02 09:40:53
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ZZCQQ

木虫 (正式写手)

早起哒虫砸有鸟吃(⊙o⊙)
一次种植一大批，或者温室培养催花？嗯哒，表示并木有玩过花粉，我只是来帮顶的，and留爪同问。
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今天是个好日子~
2楼2015-12-04 11:01:56
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scwer

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ZZCQQ at 2015-12-04 11:01:56
一次种植一大批，或者温室培养催花？嗯哒，表示并木有玩过花粉，我只是来帮顶的，and留爪同问。
3楼2015-12-06 15:34:53
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

我是专门做测序服务的，以下建议希望可以帮到楼主：
植物样品的收集方法：将组织放入1.5ml或2.0ml RNase-free的EP管中，每管100mg左
右，准确标记，加入RNAlater或类似的RNA组织保存试剂，液氮速冻
后使用封口膜封口，将EP管放置于50ml离心管中或密封性好的小塑料袋中，干冰运输。
对于花药和楼主描述的难点，建议先在EP管里装入RNA later，每次收集的花药取下后立即导入管中，震荡；反复多次即收集一管，多管累积达到测序要求的量。也就是说你把管子拿在手里，接着花药，直接入管。

希望跟楼主合作，荷花我都做过的，哈哈
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我就是我IamwhatIam
4楼2016-01-13 21:24:46
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