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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 换taq酶后pcr产物有杂带
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Echo以梦为马

新虫 (小有名气)

[交流] 换taq酶后pcr产物有杂带

图中点样顺序一次为基因r(54度)，基因r(53度)两个孔，基因k(52度)4个孔，原来用的是extaq,基因r最适温度53,基因k为52度，现在用rtaq，takala的酶

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1楼 2015-11-29 20:52:55
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Echo以梦为马

新虫 (小有名气)
怎么图片没有发送出去，再发一次
换taq酶后pcr产物有杂带



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2楼2015-11-29 20:54:12
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Echo以梦为马

新虫 (小有名气)
谁能帮忙解答一下

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3楼2015-11-30 08:26:46
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Echo以梦为马: 金币+1 2015-11-30 09:36:49
你的图片是什么鬼？？？如果你再换个酶有可能也p的不一样，现在个人感觉takara的酶品质不行啦！只要你的目的条带大小没问题就行了，把它切下来回收就行了。

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相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
4楼2015-11-30 08:54:36
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Echo以梦为马

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ~春梦秋云~ at 2015-11-30 08:54:36
你的图片是什么鬼？？？如果你再换个酶有可能也p的不一样，现在个人感觉takara的酶品质不行啦！只要你的目的条带大小没问题就行了，把它切下来回收就行了。

markerDL2000,基因片段也都是2000bp左右，前面的有杂带，后面的没有产物，什么原因呢

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5楼2015-11-30 09:38:29
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Echo以梦为马: 金币+1 2015-11-30 11:29:02
后面大概是你的退火温度太低了，一般退火温度比引物小5度就差不多了。

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相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
6楼2015-11-30 09:59:27
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Echo以梦为马

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ~春梦秋云~ at 2015-11-30 09:59:27
后面大概是你的退火温度太低了，一般退火温度比引物小5度就差不多了。

这是之前老师给的条件，她坚持让我按之前的步骤，只更改Tm值，该怎么进行

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7楼2015-11-30 11:30:24
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Echo以梦为马

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ~春梦秋云~ at 2015-11-30 09:59:27
后面大概是你的退火温度太低了，一般退火温度比引物小5度就差不多了。

设置温度梯度重新pcr，结果还是没有条带，会不会是DNA的问题，我用的是cDNA文库，如果改用这个菌的基因组可不可以

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8楼2015-12-01 11:06:56
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jzhwang2007

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不同酶的延伸温度不一样，需要调的。或者就换回原先的酶吧。
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9楼2015-12-02 00:08:18
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