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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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SorryJ

银虫 (小有名气)

[求助] 为何我的质粒到农杆菌GV3101里转了一圈出来就出问题了?

最近将一个质粒导入农杆菌GV3101中,最后再提取质粒,做质粒PCR,结果用载体引物跑不出条带,用片段引物可以跑出条带,大小正确。阳性对照就是用的导入农杆菌前的这个质粒,阳性对照的结果是载体引物和片段引物都能跑出条带,且条带大小正确。我就纳闷儿了,同一个质粒,导入前后差别咋这么大呢?请问这是怎么回事啊?有没有大神帮我这菜鸟解释一下?

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SorryJ

银虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by yf198400 at 2015-11-27 08:56:58
你提取出来的质粒有没有和对照质粒跑个电泳比较一下,确认你挑的菌株是否转化成功

在提质粒前有做菌落PCR,菌P结果也是载体引物跑不出来,片段引物可以,随后选了正常点的去摇菌,提质粒,质粒PCR结果跟菌P还是一样,载体引物跑不出来。我也有直接拿质粒跑胶,正常的。总之就是本来载体引物,片段引物能扩出来的一个质粒,导入到农杆菌里转了一圈回来,就变成了只有片段引物能扩出来了。

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3楼2015-11-27 12:41:59
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yf198400

新虫 (小有名气)


你提取出来的质粒有没有和对照质粒跑个电泳比较一下,确认你挑的菌株是否转化成功

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2楼2015-11-27 08:56:58
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