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为何我的质粒到农杆菌GV3101里转了一圈出来就出问题了?
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最近将一个质粒导入农杆菌GV3101中,最后再提取质粒,做质粒PCR,结果用载体引物跑不出条带,用片段引物可以跑出条带,大小正确。阳性对照就是用的导入农杆菌前的这个质粒,阳性对照的结果是载体引物和片段引物都能跑出条带,且条带大小正确。我就纳闷儿了,同一个质粒,导入前后差别咋这么大呢?请问这是怎么回事啊?有没有大神帮我这菜鸟解释一下? 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2015-11-27 08:56:58
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在提质粒前有做菌落PCR,菌P结果也是载体引物跑不出来,片段引物可以,随后选了正常点的去摇菌,提质粒,质粒PCR结果跟菌P还是一样,载体引物跑不出来。我也有直接拿质粒跑胶,正常的。总之就是本来载体引物,片段引物能扩出来的一个质粒,导入到农杆菌里转了一圈回来,就变成了只有片段引物能扩出来了。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2015-11-27 12:41:59










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