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Karida_14

新虫 (小有名气)

[交流] 转化 已有10人参与

不知道为什么转化不管涂板多少都长的满板都是,转化就跟一般程序一样,涂板的时候涂50,200,500,都是长的满板,挑不到单菌落,用的菌种是DH5a,转化效率没有那么高才对

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xushiqi001

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有可能抗生素失效。

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4楼2015-11-25 12:22:44
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misang

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by Karida_14 at 2015-11-26 21:18:55
你用20微升划线?
...

肯定没那么多,就是用牙签蘸一下菌液或挑一下菌划线

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20楼2015-11-26 21:27:49
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普通回帖

beiice

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你转的是什么,还有转入DH5α之后冰浴热激之后不是加液体培养基嘛,那个摇的时间你可以适当缩短,浓度会小,就不会满板了应该,建议试试

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2楼2015-11-25 11:29:24
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51mimi

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想要单菌还不容易吗?可以划线,然后延伸出来,再延伸出来的延伸出来啊,会形成梯度,某个浓度总能看到单菌。怕的是你实验污染,一个不对。

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3楼2015-11-25 12:05:09
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misang

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转化只涂50-100ul就够了,太满有可能不是阳性克隆,你确定抗生素没问题?

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5楼2015-11-25 12:47:08
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liliuyang

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
摇一个小时涂100微

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6楼2015-11-25 13:13:51
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heianduck

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我一般摇菌一小时,涂板50ul就够了
7楼2015-11-25 14:37:58
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Karida_14

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by misang at 2015-11-25 12:47:08
转化只涂50-100ul就够了,太满有可能不是阳性克隆,你确定抗生素没问题?

我都是现配现用,220转摇45min,涂50微升都会长满板。

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8楼2015-11-25 15:13:10
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Karida_14

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by beiice at 2015-11-25 11:29:24
看你转的是什么,还有转入DH5α之后冰浴热激之后不是加液体培养基嘛,那个摇的时间你可以适当缩短,浓度会小,就不会满板了应该,建议试试

转的是连接产物,220转摇了45min

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9楼2015-11-25 15:14:39
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Karida_14

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by heianduck at 2015-11-25 14:37:58
我一般摇菌一小时,涂板50ul就够了

你用多少转速

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10楼2015-11-25 15:14:59
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