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11楼2015-11-25 19:10:38

misang

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8楼: Originally posted by Karida_14 at 2015-11-25 15:13:10
我都是现配现用，220转摇45min，涂50微升都会长满板。
...

我建议你重新转化，极有可能是杂菌

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12楼2015-11-25 19:41:40

misang

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8楼: Originally posted by Karida_14 at 2015-11-25 15:13:10
我都是现配现用，220转摇45min，涂50微升都会长满板。
...

建议你重新转，极有可能是杂菌，涂菌的时候20ul试试，我刚开始的时候是50ul，现在就是用牙签一蘸划线

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13楼2015-11-25 19:45:08

落雪6

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板子的抗性失效了！

14楼2015-11-25 20:56:21

shengliding

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这取决于转什么材料，若质粒DNA，一般都直接划线，不涂板，要不没法挑，如果再是电击转化，涂板更是不行。
若是链接产物，一般涂两个板，极低量和大量，但一般都不用完菌液，放在4度，若有问题还可调整，不至于再做转化。

15楼2015-11-26 08:53:58

Karida_14

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11楼: Originally posted by gyabcd-21 at 2015-11-25 19:10:38
你放了多少微升连接产物到感受态细胞啊？

5微升连接产物，50微升感受态

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16楼2015-11-26 21:16:12

Karida_14

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14楼: Originally posted by 落雪6 at 2015-11-25 20:56:21
板子的抗性失效了！

我现配现用的，而且不烫手加的抗生素

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17楼2015-11-26 21:16:49

Karida_14

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12楼: Originally posted by misang at 2015-11-25 19:41:40
我建议你重新转化，极有可能是杂菌
...

这段时间转化一直这样，重做了好多次都是一样的结果

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18楼2015-11-26 21:18:08

Karida_14

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13楼: Originally posted by misang at 2015-11-25 19:45:08
建议你重新转，极有可能是杂菌，涂菌的时候20ul试试，我刚开始的时候是50ul，现在就是用牙签一蘸划线
...

你用20微升划线？

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19楼2015-11-26 21:18:55

misang

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19楼: Originally posted by Karida_14 at 2015-11-26 21:18:55
你用20微升划线？
...

肯定没那么多，就是用牙签蘸一下菌液或挑一下菌划线

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20楼2015-11-26 21:27:49