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Karida_14

新虫 (小有名气)

[交流] 转化 已有10人参与

不知道为什么转化不管涂板多少都长的满板都是,转化就跟一般程序一样,涂板的时候涂50,200,500,都是长的满板,挑不到单菌落,用的菌种是DH5a,转化效率没有那么高才对

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shengliding

新虫 (小有名气)


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这取决于转什么材料,若质粒DNA,一般都直接划线,不涂板,要不没法挑,如果再是电击转化,涂板更是不行。
若是链接产物,一般涂两个板,极低量和大量,但一般都不用完菌液,放在4度,若有问题还可调整,不至于再做转化。
15楼2015-11-26 08:53:58
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beiice

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你转的是什么,还有转入DH5α之后冰浴热激之后不是加液体培养基嘛,那个摇的时间你可以适当缩短,浓度会小,就不会满板了应该,建议试试

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2楼2015-11-25 11:29:24
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51mimi

新虫 (小有名气)


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想要单菌还不容易吗?可以划线,然后延伸出来,再延伸出来的延伸出来啊,会形成梯度,某个浓度总能看到单菌。怕的是你实验污染,一个不对。

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3楼2015-11-25 12:05:09
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xushiqi001

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有可能抗生素失效。

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4楼2015-11-25 12:22:44
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