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豆哥主管区长 (职业作家)
制粒能手
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[交流]
【求助】关于肿瘤实验的问题
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请教高手 H22肿瘤细胞的体内传代具体的操作是怎么样的？ 传代后接种剩余的细胞怎么保存？ 如果做抑瘤率实验，选用的小鼠要不是雌雄各半？还是有别的规定？ 谢谢指教 ！！ |
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guan1901
铁虫 (初入文坛)
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2楼2008-09-17 13:00:09
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4楼2009-05-09 20:34:45
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6楼2009-05-12 16:01:32
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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1、先将细胞离心，根据需要加入一定量生理盐水调整细胞至所需浓度，然后注射在小鼠 腹腔（ 或腋窝皮下），每只0.2mL。接种腹腔的至7-9天时（时间过长可能会有血性腹水）可以抽取腹水（乳白色）进行第二次体内传代。 2、剩下的细胞加入冻存液，冻存管上需注明细胞种类及日期等，也可将管至布袋中，袋口拴棉线以便日后从液氮中取出，常规冻存于液氮中。 冻存液配方如下： 1640培养液：小牛血清：二甲基亚砜为7：2：1，并且加入DMSO时要缓慢滴入。 冻存步骤为：4°C 40min，-20°C 30min，-70至-80°C 2至3h，最后至液氮中。 3、做抑瘤实验的小鼠通常选6-8周龄，20g上下2g，如无特别说明需雌雄各半 |
7楼2009-08-13 11:35:56