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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

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[交流] 【求助】关于肿瘤实验的问题

请教高手

H22肿瘤细胞的体内传代具体的操作是怎么样的?

传代后接种剩余的细胞怎么保存?

如果做抑瘤率实验,选用的小鼠要不是雌雄各半?还是有别的规定?

谢谢指教
!!
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边学边问,才有学问。
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蜗牛VS蜗牛

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看到了别人和我说的不一样,我又具体了解了下,我觉得我说的还是没错的,虽然细节我不太清楚。
6楼2009-05-12 16:01:32
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guan1901

铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
豆哥(金币+3,VIP+0):多谢
用瘤株注入腹腔即可,但最好在相对无菌的超净台中操作。
接种后剩余的细胞可以放在液氮中冻存,接种密度大约为1.6X10 6个幂/ml  用冻存液放在1ml的冻存管中。
做抑瘤率试验小鼠的体重有要求,要不小鼠容易死掉。
2楼2008-09-17 13:00:09
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蜗牛VS蜗牛

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):多谢指导! 5-9 20:22
豆哥(金币+27,VIP+0):谢谢,全给你了 5-9 22:47
腋下注射最好
冻存看参考书具体操作
对长出肿瘤体积、小鼠体重进行筛选,分组。只选雄鼠就可以,裸鼠。
3楼2009-05-09 11:09:44
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mr_songhua


clkk216(金币+1,VIP+0):多谢指导!谢谢参与虫友讨论~~ 5-9 20:50
引用回帖:
Originally posted by guan1901 at 2008-9-17 13:00:
用瘤株注入腹腔即可,但最好在相对无菌的超净台中操作。
接种后剩余的细胞可以放在液氮中冻存,接种密度大约为1.6X10 6个幂/ml  用冻存液放在1ml的冻存管中。
做抑瘤率试验小鼠的体重有要求,要不小鼠容易死掉。

说的很全面了,我觉得瘤株注入腹腔不一定在相对无菌的超净台中操作,活的老鼠拿到细胞房会被管理员扔出去,肿瘤细胞在超净台制备好放在无菌管子里,拿到动物房给小鼠注射就行了,每只小于0.2ml。
剩余细胞可用正常细胞培养液加10%DMSO就行,就是一般细胞冻存液。
抑瘤率好像要6周以上小鼠吧。
4楼2009-05-09 20:34:45
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