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维特の节拍

铁虫 (正式写手)

[求助] 样品峰面积总是比标准品高是怎么回事? 已有1人参与

样品:称取10%叶黄素样品2.38mg,用乙酸乙酯超声30min溶解,定容至25ml容量瓶。浓度为0.0952mg/ml.
标准品1:称取叶黄素标准品2.29mg,用乙酸乙酯超声30min溶解,定容至10ml容量瓶。浓度为0.229mg/ml.
标准品2:称取叶黄素标准品1.90mg,用甲醇-乙腈49:51超声30min溶解,定容至10ml容量瓶。浓度为0.19mg/ml.
ps:标准品1,2是同一标准品,只是溶剂不同
色谱条件:
流动相:乙腈-甲醇97:3,等度,流速1ml/min,波长450nm,柱温箱:25℃。
各进样10ul,A样品=507548,A标准品(乙酸乙酯溶)=312288,A标准品(甲醇-乙腈溶)=251912.
色谱柱:Kromasil C18 5u 100A    P/N:TIAN-1825

蓝色:10%叶黄素样品(乙酸乙酯溶)    黑色:叶黄素标准品(甲醇-乙腈溶)   
红色:叶黄素标准品(乙酸乙酯溶)

样品峰面积总是比标准品高是怎么回事?
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守护冰山雪莲

版主 (文学泰斗)

木虫

优秀版主优秀版主优秀版主文献杰出贡献文献杰出贡献优秀版主

又是毕业论文吧!这种实验好多好多,重复

发自小木虫Android客户端
3楼2015-11-20 13:11:34
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mosaic5015

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 维特の节拍 at 2015-11-20 22:39:24
师兄师姐说洗柱子才用那么大比例的已腈,认为其它东西也堆到那个峰了,建议我再加水相重新分一下,前辈怎么看?

建议流动相增加水的比例,降低洗脱能力,让杂质和目标物分开,要不然都冲到一块了,峰面积当然大了
人生而不平等
10楼2015-11-21 22:01:57
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普通回帖

学术巨星

专家顾问 (正式写手)

那个10%样品是什么形状的?什么基质中的?
有可能是前处理方法原因,基质效应的影响。

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-11-20 13:05:41
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维特の节拍

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
内容已删除
4楼2015-11-20 14:45:28
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维特の节拍

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 守护冰山雪莲 at 2015-11-20 13:11:34
又是毕业论文吧!这种实验好多好多,重复

重复好几次了,总是样品峰面积大,前辈可不可以帮我脱离苦海
5楼2015-11-20 14:56:53
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
维特の节拍: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-20 16:42:05
内容已删除
6楼2015-11-20 15:28:10
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维特の节拍

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 学术巨星 at 2015-11-20 15:28:10
可以采用适当的净化方法,使目标物与其他杂质分离富集,但需要摸索净化所用的材料和条件。
也可采用不加样品的空白的基质,按同样的方法处理、分析,最后扣除相应保留时间处的峰面积。
...

意思是样品峰里还有其他物质吗?是不是因为乙腈所占的比例太大,把其他我不需要的物质也进入了峰里面,才导致峰面积过大的?
7楼2015-11-20 16:49:25
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 维特の节拍 at 2015-11-20 16:49:25
意思是样品峰里还有其他物质吗?是不是因为乙腈所占的比例太大,把其他我不需要的物质也进入了峰里面,才导致峰面积过大的?...

可能有其他杂质,也可能是基质效应是目标物紫外吸收增强。
能保证目标物被完全提取出来就行,不用特意降低乙腈含量。

发自小木虫IOS客户端
8楼2015-11-20 18:06:12
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维特の节拍

铁虫 (正式写手)

师兄师姐说洗柱子才用那么大比例的已腈,认为其它东西也堆到那个峰了,建议我再加水相重新分一下,前辈怎么看?

发自小木虫Android客户端
9楼2015-11-20 22:39:24
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