应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 指状青霉菌丝扫描电镜样品前处理
51/1返回列表
查看: 2302  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

vivi3168

新虫 (小有名气)

[求助] 指状青霉菌丝扫描电镜样品前处理 已有2人参与

实验需要用扫描电镜观察抑菌剂处理过的指状青霉菌丝表面形态的变化，我用的是PDA固体培养基培养的菌种，文献上说是从菌落边缘取一菌饼，放入2.5%的戊二醛中固定，然后PBS漂洗、梯度乙醇脱水、再干燥，我不明白这个菌饼的取法，是连带着培养基也取出吗？PBS漂洗是离心还是只是冲洗几遍？我想烘干或自然晾干，如果带着培养基的话，培养基会有残留吧？电镜小白求指导啊。。。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-11-19 09:05:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivi3168

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 草溪河 at 2015-11-19 22:55:35
首先取样时在菌落边缘连同培养基切成1-2 X 5 mm大小的样块，最好保持菌块原样，否则会影响菌丝形态。样品处理过程不会用到离心机，漂洗就是用PBS浸泡，将样品中的溶液置换成PBS，包括之后的梯度脱水和乙酸异戊酯置换 ...

最后一步临界点干燥，因为没有相应的干燥仪器，是否可以晾干或风干？
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-22 09:44:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lark001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据楼主的问题，下面几点可作参考：
（1）“PDA固体培养基培养的菌种，文献上说是从菌落边缘取一菌饼”，个人认为是用接种环在菌落上刮取菌体，轻轻地、尽量不刮到培养基；液体培养基的话，高速离心，弃去培养基即可；
（2）PBS漂洗：这是为了去除上一步的固定液，可以冲洗，也可以加入PBS，轻轻振荡，混合后，再弃去PBS；
（3）经过梯度脱水后，是可以自然晾干的，这样会比较慢，可以将其放置于接种台，打开风扇，会快一些；当然用临界点干燥更好。
祝实验顺利！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-11-19 09:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivi3168

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lark001 at 2015-11-19 09:44:04
根据楼主的问题，下面几点可作参考：
（1）“PDA固体培养基培养的菌种，文献上说是从菌落边缘取一菌饼”，个人认为是用接种环在菌落上刮取菌体，轻轻地、尽量不刮到培养基；液体培养基的话，高速离心，弃去培养基即 ...

谢谢亲回复~我也想过用液体培养基，不过菌丝会相互缠绕成小球，不知道这个会不会影响电镜观察？培养初期形成片状，可否取这个时期的菌丝？还有一个问题，是否可以省略乙醇脱水这步然后向你说的那样直接风干？看也有文献是这样做的。。。帮忙指点一下吧
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-19 13:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草溪河

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先取样时在菌落边缘连同培养基切成1-2 X 5 mm大小的样块，最好保持菌块原样，否则会影响菌丝形态。样品处理过程不会用到离心机，漂洗就是用PBS浸泡，将样品中的溶液置换成PBS，包括之后的梯度脱水和乙酸异戊酯置换，之后直接用吸管或移液枪直接吸出即可。干燥是指用CO2临界点干燥，除去样品中的水分。之后再经喷金镀膜后就可以上机看了。一般情况下，电镜室应该有负责的老师可以请教和制样方法参考。
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-19 22:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +14 爱看书的可乐 2026-08-26 16/800 2026-08-26 16:47 by skyjudy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 我不理解！ +8 Edward_pc 2026-08-26 13/650 2026-08-26 15:37 by Tide man
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭