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李豆豆416

铁虫 (小有名气)

[交流] 多次pcr均无法获得大量的目的 已有20人参与

有一段基因序列,始终pcr不出来,模版没有问题,引物换了好几对,也做过梯度,可是条带很暗,无法纯化,这是什么原因?请大家赐教

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科学小覃

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by 李豆豆416 at 2015-11-18 14:17:57
基因中的AT含量很高
...

AT或GC不管哪个偏高都会容易链内互补的二级结构,所以要提高退火温度
生物科学
19楼2015-11-19 08:13:02
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
顶~我也遇到了同样问题

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2楼2015-11-17 16:02:46
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xushiqi001

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换酶。你别的PCR有问题么。

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3楼2015-11-17 16:08:56
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李豆豆416

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xushiqi001 at 2015-11-17 16:08:56
换酶。你别的PCR有问题么。

酶换过了,用extaq,和lftaq都不行

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4楼2015-11-17 16:20:55
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