24小时热门版块排行榜    

查看: 280  |  回复: 4
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 收获的金秋 的 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

收获的金秋

[交流] 求助PCR问题

我们实验室做一对特异引物PCR扩增,突然出现弥散条带,同样的体系同样的反应条件,用以前扩出来的模板同样弥散,现已经排除排除dNTP、Mg2+及酶的问题,望各位大侠给以下参考意见!谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shujing2821

铁虫 (初入文坛)

如果marker也呈弥散装的话,可能是胶出现了问题,建议重新配下胶,再跑一遍试试。
5楼2008-09-19 00:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

peng5053

银虫 (正式写手)

Dr.

对于你这种情况,在排除了其他的因素的情况下可能是由于退火温度造成的目的片段特异性不强。建议你提高退火温度,从而增强目的片段的特异性!对于所加入的模板量,循环次数都有可能造成特异性下降,一般循环30次就可以了,模板量也不要加的过多。如果还是出现类似的现象可以采用降落PCR(touchdown pcr).
多点思维,多点idea
2楼2008-09-15 19:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gmdp

金虫 (小有名气)

电泳没出问题?
3楼2008-09-17 23:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江枫渔火

铜虫 (小有名气)

可以试着提高退火温度,或降低电泳时的电压
4楼2008-09-18 19:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +11 wangze12014 2026-08-14 13/650 2026-08-21 11:00 by 大快人心啦
[基金申请] 我面上完蛋了 +6 且听虎啸 2026-08-20 6/300 2026-08-21 10:59 by Vivilian
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见