24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 247  |  回复: 4
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 收获的金秋 的 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

收获的金秋

[交流] 求助PCR问题

我们实验室做一对特异引物PCR扩增,突然出现弥散条带,同样的体系同样的反应条件,用以前扩出来的模板同样弥散,现已经排除排除dNTP、Mg2+及酶的问题,望各位大侠给以下参考意见!谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江枫渔火

铜虫 (小有名气)

可以试着提高退火温度,或降低电泳时的电压
4楼2008-09-18 19:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

peng5053

银虫 (正式写手)

Dr.

对于你这种情况,在排除了其他的因素的情况下可能是由于退火温度造成的目的片段特异性不强。建议你提高退火温度,从而增强目的片段的特异性!对于所加入的模板量,循环次数都有可能造成特异性下降,一般循环30次就可以了,模板量也不要加的过多。如果还是出现类似的现象可以采用降落PCR(touchdown pcr).
多点思维,多点idea
2楼2008-09-15 19:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gmdp

金虫 (小有名气)

电泳没出问题?
3楼2008-09-17 23:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shujing2821

铁虫 (初入文坛)

如果marker也呈弥散装的话,可能是胶出现了问题,建议重新配下胶,再跑一遍试试。
5楼2008-09-19 00:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 317求调剂 +4 十闲wx 2026-03-24 4/200 2026-03-27 12:08 by 不吃魚的貓
[考研] 材料292调剂 +11 橘颂思美人 2026-03-23 11/550 2026-03-27 11:25 by wangjy2002
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 316求调剂 +5 江辞666 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:08 by hypershenger
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 食品工程专硕求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 3/150 2026-03-27 01:14 by dgnhs
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 352求调剂 +4 大米饭! 2026-03-22 4/200 2026-03-26 16:40 by 不吃魚的貓
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
请填处理意见