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奋斗小强.

铜虫 (正式写手)

[求助] 求助怎样培养成纤细胞? 已有3人参与

我做了一种用于载药的水凝胶,写了一篇论文,审稿人要求补充生物相容性的细胞实验,由于我没有做过细胞培养方面的实验,特来小木虫求助,多谢!
问题:
1.常用的动物细胞培养基有哪些,我查到DMEM,不知道用这一种怎么样?

2,我想培养成纤细胞(文献里自己提取,我们没有条件),所以想直接从中科院昆明动物研究所购买,不知道那种成纤细胞最好培养?最好是不容易死,容易增殖那种,求推荐?

3,我查到MTT和CCK8两种检测方法,由于我只需要五个24孔培养板就好,而CCK8方便一些,但是比较贵,请专业人士推荐一下。

4,我计划培养成纤细胞6.12.24.48.72h,五组样,不知道对于成纤细胞是否合适?培养完以后,能不能给生长的细胞拍张照呢?
思路有些乱,还望专业人士不吝赐教,多谢多谢!如果有广州的小伙伴帮忙,我将不胜感激!

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wushaokang

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
常见培养基我用过的有1640  DMEM两种,以前养过人皮肤成纤维细胞,前一半周期生长比较慢,,剪碎组织块,然后分散在培养基中,大概几天时间会有贴壁细胞,然后小心换液,用胎牛血清哦。MTT没有另一种准确,但是成本低,6小时细胞勉强贴壁吧,个人觉得有点短

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2楼2015-11-16 08:09:31
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奋斗小强.

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wushaokang at 2015-11-16 08:09:31
常见培养基我用过的有1640  DMEM两种,以前养过人皮肤成纤维细胞,前一半周期生长比较慢,,剪碎组织块,然后分散在培养基中,大概几天时间会有贴壁细胞,然后小心换液,用胎牛血清哦。MTT没有另一种准确,但是成本 ...

好的,谢谢!

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3楼2015-11-16 10:35:01
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y224x116y

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

培养基的话1640比较常用,DMEM,MEM等等都很多,一般的细胞培养都会加上10%的胎牛血清。成纤维细胞鼠源的像NIH-3T3特别好养,增值速度特别快.你要检测什么呢?细胞拍照的话跟方便,只要你的显微镜是加相机的就可以。
做最好的自己
4楼2015-11-20 13:19:34
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13986003966

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好!动物细胞培养基种类很多,常用的有MEMα、1640、DMEM、MEM、DMEM/F12等等。具体的需要哪种成纤维细胞建议再查下相关文献,细胞系肯定是要好养些的,原代的成纤维细胞传代数也就10代左右,培养相对要求高一点。
5楼2015-11-26 15:30:50
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