24小时热门版块排行榜    

查看: 4713  |  回复: 38

xushiqi001

新虫 (小有名气)

做实验的天才。666。

发自小木虫Android客户端
31楼2015-11-16 17:36:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆子的星空

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这转化率也太高了,你确定不是IPTG或者X-G有问题?还是建议坐下菌液PCR,要是没有问题就恭喜你了。不过现在蓝白斑都不做了,建议用红白斑筛选,很简单方便的!
Idobelieve
32楼2015-11-17 21:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wcq吴超群

新虫 (小有名气)

红白班?我觉得我的xgal有问题,下次准备换了

发自小木虫Android客户端
33楼2015-11-18 14:56:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuhua123345

新虫 (初入文坛)

可以用下中美泰和他们公司的无缝连接试剂盒,连接加转化只需20分钟,还有他们的TOPO载体,真能做到无背景,并且连接加转化只需5分钟,阳性率能达到95%
34楼2015-11-18 15:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwuqaz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以做一个对照,就是转空载体进去,看看有没有蓝斑咯

发自小木虫IOS客户端
35楼2015-11-18 16:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wcq吴超群

新虫 (小有名气)

引用回帖:
35楼: Originally posted by wuwuqaz at 2015-11-18 16:08:23
可以做一个对照,就是转空载体进去,看看有没有蓝斑咯

哦,你的意思是说,不做载体连接,用空载体做转化,然后作为对照?下次试试

发自小木虫Android客户端
36楼2015-11-19 01:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

218854055

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的问题已经解决了。全是白斑,还是可以继续用T7/SP6通用引物做菌落PCR,看不是预期大小片段就可以了,如果达到预期大小可以送测序。不怕白斑多,就怕假阳性。
37楼2015-11-28 13:18:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1202ld

新虫 (初入文坛)

之前用的是PMD 19,这个转化效率更高,4℃孵育过夜。忘了具体是几个小时。细胞也是用的takara的JM109,我觉得你没蓝斑出来,细胞是没有问题的,会不会加错载体,因为我之前干过这样的蠢事…

发自小木虫Android客户端
38楼2015-11-28 15:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

判官小艾

木虫 (正式写手)

读研有时候需要的是勇气

这种情况怕是自己也不相信结果,不妨提质粒检测下,或者菌落pcr 验证下

发自小木虫Android客户端
就让那流水带走光阴的故事
39楼2015-11-28 16:17:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wcq吴超群 的主题更新
信息提示
请填处理意见