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919547443

金虫 (小有名气)

[求助] 请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事?已有2人参与

我的流动相是       A含有0.1%的甲酸,B是0.1甲酸的甲醇
洗脱是:0-5       A 100%  B  0
              5-25    A 0          B  100%
             25-35   A 100%    B  0
              35-60  A  100%   B  0
测的是橙皮苷
这个是我跑的溶剂  DMSO ,, 我想问的是后期35-55min那种情况的峰是什么原因引起的?用的都是色谱纯的,都过滤了

请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事?
IMG_20151115_161717.jpg
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919547443

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by sytucom at 2015-11-17 11:35:35
我很好奇,为什么你的标品不是在梯度洗脱期间出峰。而是在冲洗柱子的时候出峰?
如果你的样品在梯度洗脱期间不出峰,那么梯度洗脱意义何在?
可能是我知识太狭隘了,真心不懂。
放弃应助,哈哈哈...

其实我也不懂,是老师的方法,做液质的,之前做过,不过仪器不一样,以前出峰也是在20分钟左右的

发自小木虫Android客户端
11楼2015-11-17 11:46:49
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shenyingbin

铁杆木虫 (著名写手)

海猫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一、跑一针空针看下,最好先把基线跑平。
第二、DMSO是溶剂样品的吗?最好能用流动相溶解你的样品和标样,这样可以排除你提取溶剂DMSO的影响。
第三、后面35min以后应该是个混合成分,没有分开,全在一起,所以你要跑空针,排查下原因。
第四、根据测定的成分,选择合适的紫外波长,这个也有影响。
既往不恋,纵情向前!
2楼2015-11-15 18:09:42
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下,并无新事

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
919547443: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-11-21 17:17:09
25分钟以后是柱子平衡的过程,也就是25分钟以后出来的东西,不代表任何东西。
其次,你的实验条件设计的很不合理,没有冲洗柱子的过程,平衡时间太长。建议25-35修改为0 100. 然后35-45 100, 0. 即可。
已有的事,后必再有,已行的事,后必再行。
3楼2015-11-15 18:36:19
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919547443

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sytucom at 2015-11-15 18:36:19
25分钟以后是柱子平衡的过程,也就是25分钟以后出来的东西,不代表任何东西。
其次,你的实验条件设计的很不合理,没有冲洗柱子的过程,平衡时间太长。建议25-35修改为0 100. 然后35-45 100, 0. 即可。

可是我跑的是样品的话,在36分钟左右会出峰,应该是我的样品峰,我用的是橙皮苷标品做的
请教各位液相的峰出现这种情况是怎么回事?-1
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4楼2015-11-16 09:05:15
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