| 查看: 988 | 回复: 11 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
zyjwl2004木虫 (正式写手)
|
[交流]
PCR无法扩增出产物
|
||
| 如题，我扩了很多次，也尝试了很多条件，都扩不出来，不知道是那里出问题了。引物应该是没有什么问题的，有上海生工合成的，电泳后有引物二聚体。模板DNA也没有什么问题，电泳时质粒有三条带。其他的dNTP和Tag酶是宝生的，问题就是怎么扩都扩不出来，急啊请教各位，我该怎么办?谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
085701环境工程，267求调剂
已经有12人回复
-
320分，材料与化工专业，求调剂
已经有7人回复
-
085701环境工程求调剂
已经有8人回复
-
295材料工程专硕求调剂
已经有5人回复
-
265求调剂
已经有8人回复
-
322求调剂
已经有4人回复
-
085602 307分 求调剂
已经有6人回复
-
0856，材料与化工321分求调剂
已经有7人回复
-
0703化学求调剂，各位老师看看我！！！
已经有5人回复
-
266分，求材料冶金能源化工等调剂
已经有7人回复
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
2楼2008-09-13 09:43:25
3楼2008-09-13 10:27:54
lifei-fei
金虫 (著名写手)
伊丽莎白
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1070.1
- 红花: 2
- 帖子: 1577
- 在线: 4.2小时
- 虫号: 588454
- 注册: 2008-08-22
- 性别: MM
- 专业: 作物分子育种
4楼2008-09-13 13:05:47
victorhan
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3209.1
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 480
- 在线: 52.9小时
- 虫号: 596737
- 注册: 2008-09-09
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2008-09-13 14:21:54
6楼2008-09-13 22:19:42
足下客
木虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1858.8
- 散金: 211
- 红花: 12
- 帖子: 888
- 在线: 110.4小时
- 虫号: 426612
- 注册: 2007-07-28
- 性别: MM
- 专业: 临床分子生物学检验
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
|
我跟楼主碰到过相同的问题，但不知楼主所要扩的基因片段是多大的？ 我扩一个2.8KB的片段，花了我一个多月的时间才摸清条件。 如果片段长度大，建议你使用LA taq酶 和2*GC buffer I 或2*GC buffer II，首选第一种buffer。如果片段长度不大，可以试一下2*taq mix 可能你的退火温度选的也不合适，请问你的GC百分比是多少？ PS：我用的引物都是Invitrogen合成的，从来没出过问题 出现引物二聚体是很正常的，可以用Primer5给你的引物打一下分，一般要在五十分以上才能比较容易地扩出 [ Last edited by 足下客 on 2008-9-14 at 13:21 ] |
7楼2008-09-14 13:18:04
zyjwl2004
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 3360.8
- 散金: 100
- 帖子: 591
- 在线: 40.3小时
- 虫号: 446332
- 注册: 2007-10-29
- 性别: GG
- 专业: 土壤学
8楼2008-09-15 10:16:54
shuhua759
捐助贵宾 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 6044.2
- 散金: 1
- 红花: 4
- 帖子: 1181
- 在线: 594.8小时
- 虫号: 504959
- 注册: 2008-02-16
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2008-09-16 12:22:04
10楼2008-09-16 18:08:58
10
