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雨停了20

新虫 (初入文坛)

[求助] WB条带有气泡是什么原因引起的？如何避免？ 已有6人参与

最近做的WB图片，曝光条带有气泡，请问是什么原因引起的啊？该如何避免呢？

WB条带有气泡是什么原因引起的？如何避免？
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1楼 2015-11-11 16:10:36
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

唯不忘相思

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:58:30
转膜的时候在胶和膜接触的面有气泡。在转膜的时候可以先加转膜缓冲液将膜润湿，胶和膜放好后可以用玻璃棒轻轻擀几下，就可以减少胶和膜之间的气泡。特别是在你需要的蛋白条带附近一定要细心检查。
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2楼2015-11-11 19:52:00
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啦啦啦大胖子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:58:49
转膜，封闭，抗体孵育过程中都可能产生气泡，在这个过程中一定要避免气泡的产生。
1.转膜的时候可以用一次性涂布棒之类的东西赶走气泡；
2.封闭，抗体孵育的时候，如果是液体很多的话，基本不会有气泡产生，如果液体很少，可以用枪吸走气泡。
PS:一般我们都是用测序带之类的东西加液体进去后，用封口的东西封到膜的大小左右，再加膜，有气泡的话，就用枪吸走气泡，封最后的口，保证液体与膜尽可能接触。
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4楼2015-11-11 20:31:02
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:59:35
一般我铺滤纸和膜还有胶神马的时候都是拿盆泡在转膜液里面铺的，这样很不容易出气泡

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5楼2015-11-11 21:18:59
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普通回帖

冰城＇若雪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-11 22:59:17
转膜时出现的，在转膜液中可以加入一定量的甲醇，盖上上面那层滤纸后，可用玻璃棒来回滚动

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3楼2015-11-11 20:20:58
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liweiwaxmc

铜虫 (小有名气)
封闭和孵育用盒子摇床！转膜上面几楼是正确方法！

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shop112047695.taobao.com（WB耗材全系列）
6楼2015-11-11 23:26:37
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qinqqjiajia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
铺膜的时候在转膜液里铺，铺好再用玻璃棒从一边向另外一边滚动数次，赶走气泡
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7楼2015-11-12 13:27:08
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雨停了20

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 唯不忘相思 at 2015-11-11 19:52:00
转膜的时候在胶和膜接触的面有气泡。在转膜的时候可以先加转膜缓冲液将膜润湿，胶和膜放好后可以用玻璃棒轻轻擀几下，就可以减少胶和膜之间的气泡。特别是在你需要的蛋白条带附近一定要细心检查。

转膜的时候我是先用甲醇活化膜15S左右，然后放入转膜缓冲液中平衡5min，将膜放在胶上后用塑料板子刮了几下，放上滤纸后也刮了几下。想请问一下，用夹子夹好后在转膜缓冲液体系里面，还有形成气泡的可能吗？就是说已经在转膜了，还有可能形成气泡吗？
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8楼2015-11-12 14:29:40
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雨停了20

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰城＇若雪 at 2015-11-11 20:20:58
转膜时出现的，在转膜液中可以加入一定量的甲醇，盖上上面那层滤纸后，可用玻璃棒来回滚动

谢谢您的回答。我放好滤纸后也刮了几下的，不知道为什么有气泡。
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9楼2015-11-12 14:30:52
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wc2896920

新虫 (初入文坛)
应该是转膜没转好的原因吧

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10楼2015-11-12 14:57:52
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