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如鱼饮水YCR

新虫 (小有名气)

[求助] 求WB大神指点迷津 已有4人参与

我做的是SDS-PAGE电泳,目标蛋白在16KD左右,电泳条件是30mA 150V 一个半小时,Marker的范围是14-120KD,但是Marker的最后两条带分不开是怎么回事,急求各位大神们指导!!!

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sxs1022

新虫 (小有名气)

没有图和具体信息,只能猜测你用的分离胶浓度可能不对

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2楼2015-11-08 17:12:53
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lz0308

木虫 (正式写手)

我是一只小小小小乌龟,爬啊爬啊爬啊爬、、、、、
3楼2015-11-08 17:40:29
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
正常,以前我在做原核蛋白表达纯化的时候,跑到胶底部的时候很容易出现这种情况,你可以看看可能是胶的原因,比如试剂,主要是AP和丙烯酰胺,还有胶的浓度是否太低。
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
4楼2015-11-09 09:51:38
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syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是胶的问题,你现在胶浓度多少?可适当提高点胶浓度
5楼2015-11-09 10:23:40
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jzhwang2007

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

胶的浓度太低了,用15%的分离胶试试。
6楼2015-11-11 00:50:53
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sunshine0691

金虫 (小有名气)

16kD  分离胶浓度多少?marker只要你要的那个分子量的能跑开就可以啦 不用全跑开哒

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7楼2015-11-11 00:55:34
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小小技术官

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

电压高了吧 胶应当浓一点
生活是一面镜子,要笑着面对!
8楼2015-11-11 08:34:00
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