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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相流动相缓冲盐问题
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是谁再一次

金虫 (正式写手)

[交流] 液相流动相缓冲盐问题 已有5人参与

做液相有缓冲盐时，走梯度可以走到高比例有机相吗？今天做液相的时候泵压突然变0了，一开始有用50%乙腈水冲，然后用起始梯度的乙腈水冲，最后换上乙腈0.1%磷酸水走梯度到95乙腈磷酸水，在梯度最后乙腈比例较大，会不会造成析晶。

另外就是一开始建立的缓冲盐相平衡的方法莫名其妙的变成百分百乙腈，停止跳回初始的85%磷酸水，会不会这个才是导致泵压为0的原因，但这之后跑了一针是没问题的，下一针才出现泵压为0

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-11-06 01:22:48
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viviansue

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我用的是waters 长时间用乙腈水冲系统会出现 Lose prime 的现象 这个很正常 以为乙腈水是粘滞液体 会黏住单向阀
我一般 try prime 一下就会恢复正常了 所以一般不要用乙腈水长时间冲系统

至于会不会析出  这个不好说 看你磷酸缓冲的浓度
我建议还是最好别用那么大的比例

100% 乙腈 之后 如果想转回原来流动相比例 最好在工作站中设定一定的转换时间 先转成有机相：水 后用磷酸盐 慢慢替代水
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来自大洋彼岸小药分一枚
8楼2015-11-06 22:40:46
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匿名

禁虫 (知名作家)
本帖仅楼主可见
2楼2015-11-06 04:50:03
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
走到95%的乙腈应该没有太大问题，你可以先把缓冲盐和有机相混合一下（最大有机相比例）看有没有析出
我曾经试过95%乙腈和0.2M甲酸铵，95%乙腈和10mM醋酸铵都没有问题
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3楼2015-11-06 08:54:25
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shen2003 at 2015-11-06 04:50:03
单向阀堵了

我感觉应该是，走纯乙腈的时候可能结晶了，但是超了两次，用甲醇冲了冲，还是没用，泵也没有那个有规律的声音了，把滤头从流动相里拿出来也没有看到液体在走动，不会是泵坏了吧。
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4楼2015-11-06 12:05:07
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