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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相流动相缓冲盐问题
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是谁再一次

金虫 (正式写手)

[交流] 液相流动相缓冲盐问题 已有5人参与

做液相有缓冲盐时，走梯度可以走到高比例有机相吗？今天做液相的时候泵压突然变0了，一开始有用50%乙腈水冲，然后用起始梯度的乙腈水冲，最后换上乙腈0.1%磷酸水走梯度到95乙腈磷酸水，在梯度最后乙腈比例较大，会不会造成析晶。

另外就是一开始建立的缓冲盐相平衡的方法莫名其妙的变成百分百乙腈，停止跳回初始的85%磷酸水，会不会这个才是导致泵压为0的原因，但这之后跑了一针是没问题的，下一针才出现泵压为0

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-11-06 01:22:48
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
把几个阀超了一下，再用纯水冲了一下系统，终于可能用了。还有一个问题就是我走到高有机相比如乙腈：磷酸水=95：5时，下一针高比例水怎么平衡，是先用95的纯水再磷酸水，还是直接磷酸水就行。因为考虑高比例的有机相直接换磷酸水可能会造成堵塞。我用的是安捷轮的，用乙腈高比例对机子还有影响。
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7楼2015-11-06 21:44:58
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匿名

禁虫 (知名作家)
本帖仅楼主可见
2楼2015-11-06 04:50:03
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
走到95%的乙腈应该没有太大问题，你可以先把缓冲盐和有机相混合一下（最大有机相比例）看有没有析出
我曾经试过95%乙腈和0.2M甲酸铵，95%乙腈和10mM醋酸铵都没有问题
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3楼2015-11-06 08:54:25
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shen2003 at 2015-11-06 04:50:03
单向阀堵了

我感觉应该是，走纯乙腈的时候可能结晶了，但是超了两次，用甲醇冲了冲，还是没用，泵也没有那个有规律的声音了，把滤头从流动相里拿出来也没有看到液体在走动，不会是泵坏了吧。
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4楼2015-11-06 12:05:07
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