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关于绝对定量pcr测转基因的拷贝数
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小弟现在想用绝对定量pcr方法测转基因阳性鼠的拷贝数，现在对标准品的配置有些疑问。 通过文献:标准曲线的建立．将含外源基因的质粒与野生型猪gDNA混合，设置含有1、2、4、8和16个转基因拷贝数的标准品对照，具体如下：假设含有转基因片段的质粒大小为abp，野生型猪基因组DNA用量为bng，转基因片段完全随机地头尾相连(或头头相连)插入一条染色体上，由于转基因组猪DNA单倍体(haploid)大小为3*10^9bp，那么bng的转基因阳性猪基因组DNA含有一个转基因拷贝的质量为：(a*b*0.5)/(3*10^9) ng 我的理解是：1个拷贝为: a微升野生猪DNA与a*b*0.5/3*10^9的质粒混合 2个拷贝为：a微升野生猪DNA与刚才2倍的质粒混合 以此类推配另外的标准品。。。 请问这样配置正确吗? 如果有问题，烦请做过的大神告知正确的配置方法，小弟不胜感激  |
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