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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)

[求助] 天然药物分离 已有4人参与

各位大神,我们天然药物化学过柱不是经常用到正相硅胶柱,反相硅胶柱和凝胶柱,和液相,其中正相硅胶柱适用于小极性段的,反相硅胶柱适用于大极性的,那凝胶的适用条件是什么?我在小木虫里看到说一般有二三个主要斑点可以用,那这样的话用液相不是更方便吗?我想了挺久了都不知凝胶到底什么时候才能用?

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狗狗dy

木虫 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
海洋之斌_520(卓越_先锋代发): 金币+5, 谢谢回复 2015-11-05 11:08:53
海洋之斌_520(卓越_先锋代发): 金币+5, 谢谢回复 2015-11-05 11:09:21
海洋之斌_520(卓越_先锋代发): 金币+5, 谢谢回复 2015-11-05 11:09:27
海洋之斌_520: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-08 01:10:53
凝胶柱主要以分子量或者分子大小分离,也是有一定适用范围的,酚羟基太多的不能上,在过柱子之前要过一个保护柱,我用到凝胶柱一般有两种情况,一种是粗分的时候用一下,效果很好,另一种是正相死活分不开的时候用凝胶试试,其实做植化最简便的方法就是正相粗分至点形明显,然后直接半制备,效率高,我们实验室的凝胶柱做分离的人已经不怎么用了,反倒是便宜了做合成的人

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2楼2015-11-05 02:49:22
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firmblue

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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wangkaibo123: 金币+1, 常来交流,谢谢 2015-11-06 13:09:44
海洋之斌_520: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-08 01:11:11
凝胶分离机制包括反向/吸附/分子筛。尤其适合不同结构类型(骨架类型)化合物的分离,也就是说,如果一个混合物TLC后,用硫酸乙醇显色,斑点较多,且呈现不同颜色,这时上凝胶柱比较合适。
3楼2015-11-05 08:50:00
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公仪冬儿

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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wangkaibo123: 金币+1, 常来交流,谢谢 2015-11-06 13:09:54
海洋之斌_520: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-08 01:11:24
如果正相硅胶柱分不开的时候可以试试凝胶,反正凝胶不太损失样品。我们一般用凝胶除拖尾的脂肪酸和色素,效果还可以。
4楼2015-11-05 09:11:34
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 狗狗dy at 2015-11-05 02:49:22
凝胶柱主要以分子量或者分子大小分离,也是有一定适用范围的,酚羟基太多的不能上,在过柱子之前要过一个保护柱,我用到凝胶柱一般有两种情况,一种是粗分的时候用一下,效果很好,另一种是正相死活分不开的时候用凝 ...

我是做海洋真菌的,样品都不是很多,所以要摸好条件才可以做

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好好做实验
5楼2015-11-05 21:37:07
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by firmblue at 2015-11-05 08:50:00
凝胶分离机制包括反向/吸附/分子筛。尤其适合不同结构类型(骨架类型)化合物的分离,也就是说,如果一个混合物TLC后,用硫酸乙醇显色,斑点较多,且呈现不同颜色,这时上凝胶柱比较合适。

这样啊,如果有一个主要点,而且还是沉淀,用凝胶应该好吧?

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6楼2015-11-05 21:39:09
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 公仪冬儿 at 2015-11-05 09:11:34
如果正相硅胶柱分不开的时候可以试试凝胶,反正凝胶不太损失样品。我们一般用凝胶除拖尾的脂肪酸和色素,效果还可以。

凝胶上样之前都要过滤呢,总共样品也是才几十mg,不敢浪费啊

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7楼2015-11-05 21:41:05
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firmblue

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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海洋之斌_520: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-08 01:11:55
楼主这种情况,按我的经验上凝胶可能不会有什么效果。建议,有条件做pHPLC. 没条件的话做PTLC。
8楼2015-11-06 09:14:39
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476054377

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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海洋之斌_520: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-11-08 01:13:58
一般做个预实验吧,如果是正丁醇部位的话就用大孔树脂砍断,但是其他部位一般见得最多就是用正相硅胶砍断,但是正相吸附严重,最好用最短的时间过完。一般过完正相看情况,是不是要过凝胶,过凝胶(LH-20)一般是用来除色素以及你的混合物的分子量有差别的话,凝胶也可以达到一个分离的效果。过完凝胶的话,跑个薄层看斑点多不多,不多上个液相,如果样品量上,有条件就半制备吧。如果过完凝胶觉得颜色还很深就再过多几次。跑反相我这边极性大小都用的(极性太小就不行,必须洗脱系统是甲醇水)。

我样品量有时候太少,颜色还可以的话就制备了,制备出来一般色素会除大部分的,有时候一次制备不好再制备一次。
9楼2015-11-06 09:28:59
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by firmblue at 2015-11-06 09:14:39
楼主这种情况,按我的经验上凝胶可能不会有什么效果。建议,有条件做pHPLC. 没条件的话做PTLC。

phplc没有呢,只有hplc,有些样品的量也有几g的,就是不知凝胶上样的条件,老板叫我们多做凝胶和液相呢

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好好做实验
10楼2015-11-06 19:42:20
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