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baoyu726

木虫 (小有名气)

[求助] gelred染色如何实验才能获得较好的结果?已有2人参与

我最近刚开始使用gelred染色,使用的是50ml的0.7%琼脂糖胶(预混),缓冲液是0.5XTBE。跑胶电压90,电流60,时间50min。得到的条带是w型,而且marker条带间距很远,跟EB结果不太一样。请问大家用gelred一般都是如何操作才能得到比较好的结果。
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

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baoyu726: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-05 10:02:27
Gelred一般是跑完电泳以后将胶浸入染色液中放在摇床上染10到20分钟,然后拍照的。也有像EB一样在配胶的时候加入的。效果感觉也差不多。楼主这两种方法可以都试试。条带形状不好也可能是电泳电压过高或者胶不均匀导致的,不一定都是染色问题。

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读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
2楼2015-11-04 17:14:25
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陈爱中

新虫 (小有名气)

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baoyu726: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-05 10:03:36
买来是一万倍的水溶液好像,你配胶放凉准备倒胶之前加该染色剂,你有20ml胶,就加2μl染色剂,以此类推。混匀后倒胶就好了
3楼2015-11-04 22:48:38
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baoyu726

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by keke226 at 2015-11-04 17:14:25
Gelred一般是跑完电泳以后将胶浸入染色液中放在摇床上染10到20分钟,然后拍照的。也有像EB一样在配胶的时候加入的。效果感觉也差不多。楼主这两种方法可以都试试。条带形状不好也可能是电泳电压过高或者胶不均匀导致 ...

那请问你们一般用多少电压跑胶?
4楼2015-11-05 10:02:57
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baoyu726

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 陈爱中 at 2015-11-04 22:48:38
买来是一万倍的水溶液好像,你配胶放凉准备倒胶之前加该染色剂,你有20ml胶,就加2μl染色剂,以此类推。混匀后倒胶就好了

我一般都是加热摇匀后倒入烧杯时就加入染色剂,如果放凉胶已经开始凝固了吧?
5楼2015-11-05 10:05:23
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keke226

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by baoyu726 at 2015-11-05 10:02:57
那请问你们一般用多少电压跑胶?...

100到120V吧。一般不超过120。

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读书廿年倦写字,如今翻书不识志,若知眷书悔前程,无如渔樵未识时。三年担柴熟山性,三年苦网谙水汹,前程在心自倦舒,识志何用书中清。
6楼2015-11-05 10:08:58
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