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kangaroo0513新虫 (正式写手)
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BiFC或者splitGFP的融合蛋白linker怎么选择? 已有2人参与
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话说,看了别人的文献,再使用splitGFP或者BiFC的时候,也没有太具体说怎么设计linker。。有没有有经验的大虾,指点一下,我的目的基因和半个荧光团之间的linker怎么设计比较好?另外,荧光团应该放在N端还是C端(有莫有影响)? 倒是看见一篇文献,用的splitGFP,把GFP掰成了3份,其中1份弥散表达,2份做融合蛋白,此时他用的linker是30aa的柔性linker。因此有以上问题。额外的,是不是长一些的柔性linker连接就不必纠结连在N端还是C端?但是长一些的linker会不会造成本来相距较远的两个分子出现假阳性? 我的目的蛋白一个1300bp(52kd)一个500bp(19kd)左右。。。哪位神仙狂指点me吧。。 |
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