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kangaroo0513新虫 (正式写手)
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BiFC或者splitGFP的融合蛋白linker怎么选择？ 已有2人参与
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话说，看了别人的文献，再使用splitGFP或者BiFC的时候，也没有太具体说怎么设计linker。。有没有有经验的大虾，指点一下，我的目的基因和半个荧光团之间的linker怎么设计比较好？另外，荧光团应该放在N端还是C端（有莫有影响）？ 倒是看见一篇文献，用的splitGFP，把GFP掰成了3份，其中1份弥散表达，2份做融合蛋白，此时他用的linker是30aa的柔性linker。因此有以上问题。额外的，是不是长一些的柔性linker连接就不必纠结连在N端还是C端？但是长一些的linker会不会造成本来相距较远的两个分子出现假阳性？ 我的目的蛋白一个1300bp（52kd）一个500bp（19kd）左右。。。哪位神仙狂指点me吧。。 |
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