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T-tong-0608

铜虫 (初入文坛)

[交流] 有做过金银花木樨草苷含量测定的吗? 已有3人参与

木犀草苷照高效液相色谱法(附录YI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用苯基硅烷键合硅胶为填
充剂(Agilent ZORBAX SB-phenyl 4. 6 mm X 250mm, 5fxm),
以乙腈为流动相A ,以0.5%冰醋酸溶液为流动相B,按下表
中的规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm。理论板数按木
犀草苷峰计算应不低于20 000。
时间(分钟)  流动相A(%)  流动相B(%)
0~15  10—20  90—80
15~30 20  80
30̃ 40  20̶ 30  80̶ 70
对照品溶液的制备取木犀草苷对照品适量,精密称定,
加70%乙醇制成每lml含40pg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品细粉末(过四号筛)约2g,精
密称定,置具塞锥形瓶中,精密加人70%乙醇50ml,称定重
量,超声处理(功率250W,频率35kHz〉l小时,放冷,再称定
重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续
滤液10ml ,回收溶剂至干,残渣用70%乙醇溶解,转移至5ml
量瓶中,加70%乙醇至刻度,即得。
测 定 法 分 别 精 密 吸 取 对 照 品 溶 液 与 供 试 品 溶 液 各
10(J ,注人液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含木犀草苷([C 21 H 20 O11)不得少
于0. 050%。
我用的那个推荐的苯基柱做的效果并不好,峰前沿很严重,且样品峰分离效果不好。请问用普通的C18柱能做出来吗?
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朴美憬

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以,但是理论塔板数达不到要求,需要你自己调节,药典上的还是有点虚啊

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-11-03 23:53:59
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bird73045

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
交流
層析管柱        :Agilent TC-C18, 5m, 150*4.6mm
管柱溫度        :30C
檢測器波長        :UV 348 nm
注入量        :20 L
分析時間        :60 min
移動相:
Time(min)        Flow(mL/min)        Acetonitrile(%)        0.50%磷酸(%)
0        1.0        10        90
11            18
30            20
55            20
60                10
Chlorogenic acid RT 9.78與Luteolin-7-O-glucoside RT 22.76
3楼2015-11-04 08:01:43
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T-tong-0608

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bird73045 at 2015-11-04 08:01:43
交流
層析管柱        :Agilent TC-C18, 5m, 150*4.6mm
管柱溫度        :30C
檢測器波長        :UV 348 nm
注入量        :20 L
分析時間        :60 min
移動相:
Time(min)        Flow(mL/min)        Acetonitrile(%)        0.50 ...

我们同事用c18柱也分出来了,不过峰比较宽,属于矮胖型的,跟楼上的分析方法差不多,用的25cm色谱柱,32分钟总有出的峰
4楼2015-11-04 09:53:14
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梦轻无

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
05版药典就是用的c18,峰看起来倒不错,只是测出来感觉比苯基测出来的偏高呢,会不会成分没有分离开,跑成一个峰了?

发自小木虫Android客户端
5楼2016-06-08 07:31:07
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