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rhymistq

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教关于猪胰脂肪酶水解牛奶中甘油三酯的问题 已有2人参与

为了考察奶制品的甘油酯中脂肪酸的分布,在做关于酶解甘油三酯成2位甘油单酯的实验。但是完全按照文献中(多篇英文文献)给出的方法:Tris缓冲盐,CaCl2,胆碱钠,猪胰脂肪酶,40度下酶解5 min,水解完后上液质发现怎么也水解不完全,二酯和单酯基本上一样多,而且单酯并不是只有2位的,还有不少1,3位(色谱能区分开来)。增加酶解时间也没有太大改善。有没有相关经验的同学能告诉我是为什么吗?我应该怎样才能把三酯和二酯全水解成单酯,而且能特异性水解成2位的单酯?还有就是我买的酶是在百灵威买的便宜的,25g 300多块钱,难道是酶的原因???
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蒲公英29

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知道是不是你的油脂熔点比较高,如果是的话可以适当加一点正己烷,或者超声试试。因为我就是油脂熔点比较高,出现了你这种状况。
2楼2017-09-22 17:24:42
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

最适温度35~37℃。酶反应:甘油三酯+H2O=甘油二酯+脂肪酸阴离子。对一级酯基团最易水解。甘油单酯是差的底物。
从事科研工作数载,现已退休,有一些经验可以奉献给年轻人,但电脑水平不佳,还需学习。
3楼2017-09-26 07:58:41
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