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hebau2010

新虫 (初入文坛)

[交流] 蓝莓RNA提取的一点经验 已有6人参与

本人新近做RNA提取,养得蓝莓,前后两个月了,用了生工、天根、sigma的专门针对植物RNA提取试剂盒,都失败了,之前提三叶草的倒是一次性成功的。一个是产量太低,完全按试剂盒操作,检测只有50 ng/ul左右,杂质也多。十几次的失败,对一个研三的人几乎是要放弃的了。
后来老板要求我再试试,用CTAB法,因实验室条件简陋,就从网上买的试剂,按照大家分享的方法提了一次试试,一遍成功。
一共做了两个样,一个浓度100左右,260/280=2.12,260/230=2.57,另一个失败了。不管怎么说,两个月来第一次提出来,网上也没有提蓝莓RNA的分享,摸索这么久,给有缘人看见,希望能少走弯路。无论蓝莓叶片还是果实,直接用CTAB法吧,当然,有时间也可以试试别的,我终于要解脱了
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jinnini125

木虫 (小有名气)

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 轩辕漪 at 2016-05-16 23:18:24
氯仿萃取的哪一步一定要多做几次,直到没有中间层

请教一下,您CTAB法提RNA加样品多少克,裂解液多少克?可不可以分享一下楼主的试剂怎么配的,用没用DEPC处理?之前我用10毫升离心管里加4毫升裂解液,0.8克左右样品,抽提离心中间有白色隔层,吸取上清液继续抽提,最后得到的RNA电泳都降解了只有一条5S条带,浓度也只有30左右。后来准备加大量,昨天提取魔芋球茎总RNA 但是加了2克样品15毫升裂解液在50毫升离心管,抽提完毕离心后,居然没有上清液,上层只有大量白色絮状物,下层液
体。

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8楼2016-11-23 09:55:33
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chenqiberg

金虫 (小有名气)

★
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你是哪个学校的呀?

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2楼2015-10-29 18:08:42
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yspain

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们用天根的提葡萄的效果还不错呢

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-10-29 21:37:24
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王大倩

新虫 (初入文坛)

4楼2016-05-16 22:33:14
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