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蓝莓RNA提取的一点经验 已有6人参与
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本人新近做RNA提取，养得蓝莓，前后两个月了，用了生工、天根、sigma的专门针对植物RNA提取试剂盒，都失败了，之前提三叶草的倒是一次性成功的。一个是产量太低，完全按试剂盒操作，检测只有50 ng/ul左右，杂质也多。十几次的失败，对一个研三的人几乎是要放弃的了。 后来老板要求我再试试，用CTAB法，因实验室条件简陋，就从网上买的试剂，按照大家分享的方法提了一次试试，一遍成功。 一共做了两个样，一个浓度100左右，260/280=2.12，260/230=2.57，另一个失败了。不管怎么说，两个月来第一次提出来，网上也没有提蓝莓RNA的分享，摸索这么久，给有缘人看见，希望能少走弯路。无论蓝莓叶片还是果实，直接用CTAB法吧，当然，有时间也可以试试别的，我终于要解脱了 |
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阿发贝塔
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请教一下，您CTAB法提RNA加样品多少克，裂解液多少克？可不可以分享一下楼主的试剂怎么配的，用没用DEPC处理？之前我用10毫升离心管里加4毫升裂解液，0.8克左右样品，抽提离心中间有白色隔层，吸取上清液继续抽提，最后得到的RNA电泳都降解了只有一条5S条带，浓度也只有30左右。后来准备加大量，昨天提取魔芋球茎总RNA 但是加了2克样品15毫升裂解液在50毫升离心管，抽提完毕离心后，居然没有上清液，上层只有大量白色絮状物，下层液 体。 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2016-11-23 09:55:33