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疯子J-F

木虫 (著名写手)

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[求助] 330和1900两段overlap结果是这样，怎么改进呢？已有2人参与

第一张是两片段胶回收产物电泳，后一张是overlap结果，片段比例10:1，退火温度用的55℃，求大神指点改进，谢谢了。。。

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1楼 2015-10-28 21:53:25

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andywang6137

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2015-10-29 14:50:30
你增加退火温度，或者gradient试试。一般两个条带我都是在同一个管子里回收的，然后用F1+R2做引物P一下就妥妥的。我一般都喜欢两步法，所以再设计引物的时候，都是把所有引物的TM设计在68度以上。这样会不用考虑退火 ...

你好，请问这是一个基因的两个片段吗？做overlap的作用是什么？不太懂，请指教。谢谢！