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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 间接ELISA阴性值过高
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游小鱼

铁虫 (初入文坛)

[交流] 间接ELISA阴性值过高

新手做间接ELISA，操作步骤如下：
包被（4度过夜），PBS洗涤，37度封闭(1%BSA)一小时，洗涤，加入一抗（稀释1000、2000、4000倍）37度封闭2小时，洗涤，加入二抗（稀释5000倍）37度封闭2小时，洗涤，显色，终止
阴性对照采用抗原+PBS+二抗
空白对照采用PBS+一抗+二抗

阴性值有1左右，
空白值0.1左右，
阳性值分别为2，1.8，1.3左右

求大家帮忙看看
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1楼 2015-10-28 20:37:28
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墨秦墨秦

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没做过ELISA，现在来学经验的
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静待潘多拉的旋律
5楼2018-09-05 16:02:43
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DDDDaisy

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
洗涤不是应该用PBST吗？
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3楼2016-01-03 20:35:03
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田丫头755

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个ELISA主要是检测什么的？1.3阳性值太低了，可以试一下换个封闭液，如5%脱脂乳。一抗二抗时间一个小时就可以了 ，二抗两个小时会导致背景值偏高的，应该多洗几次。
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4楼2016-01-04 10:31:18
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