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游小鱼

铁虫 (初入文坛)

[交流] 间接ELISA阴性值过高

新手做间接ELISA,操作步骤如下:
包被(4度过夜),PBS洗涤,37度封闭(1%BSA)一小时,洗涤,加入一抗(稀释1000、2000、4000倍)37度封闭2小时,洗涤,加入二抗(稀释5000倍)37度封闭2小时,洗涤,显色,终止
阴性对照采用抗原+PBS+二抗
空白对照采用PBS+一抗+二抗

阴性值有1左右,
空白值0.1左右,
阳性值分别为2,1.8,1.3左右

求大家帮忙看看
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墨秦墨秦

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没做过ELISA,现在来学经验的
静待潘多拉的旋律
5楼2018-09-05 16:02:43
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DDDDaisy

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
洗涤不是应该用PBST吗?
3楼2016-01-03 20:35:03
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田丫头755

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个ELISA主要是检测什么的?1.3阳性值太低了,可以试一下换个封闭液,如5%脱脂乳。一抗二抗时间一个小时就可以了 ,二抗两个小时会导致背景值偏高的,应该多洗几次。
4楼2016-01-04 10:31:18
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