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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

[求助] HPLC连续进样峰面积降低问题 已有1人参与

Waters 2695 298PDA检测器,同时测定某个中药中的三个成分。样品采用80%甲醇超生提取30分钟,15000r/min高速离心后进样,乙睛-水梯度洗脱。
在做方法学考察时,稳定性,精密度RSD都符合要求,但在做重复性时,同一样品连续进样2针,第2针峰面积明显低于第1针。用磷酸冲洗通道后,进甲苯和苯的混标,连进6针,RSD均低于1%。但是做我的样品连进4针,峰面积逐渐降低,三个峰的峰面积RSD均达到5%。
求助:峰面积降低的情况时不时出现,期间也有过连进6针正常的情况,出现这样的情况到底是哪里有问题?请有经验的朋友帮忙分析解答一下,在此谢过!!

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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
三种可能原因:1.样品不稳定,可能是分解,也可能析出
2.瓶盖盖的太紧,多次进样后,样品瓶内形成负压,导致进样器无法准确吸出样品
3.色谱峰差,导致一部分峰(起始和末尾阶段)达不到积分斜率,无法积分

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微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
2楼2015-10-28 16:12:26
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曲直炎上

金虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by voyager88 at 2015-10-28 16:12:26
三种可能原因:1.样品不稳定,可能是分解,也可能析出
2.瓶盖盖的太紧,多次进样后,样品瓶内形成负压,导致进样器无法准确吸出样品
3.色谱峰差,导致一部分峰(起始和末尾阶段)达不到积分斜率,无法积分

样品应该不会有问题。我做液相也有一段时间了,每次也都按步骤做,盖子也一直这么拧。重复坐了很多次老是出现这样的问题,也真是醉了

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3楼2015-10-30 09:53:45
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