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木子李li

木虫 (小有名气)

[求助] HPLC对磺胺类药物的分析与检测 已有9人参与

使用的HPLC仪器为日立primaide 型,其中的柱温箱是自己组装的(应该是当时买时觉得太贵所以组装的)其型号是HT-230A,
现在遇到的问题是流动相配比、流速、温度等等条件都相同,为什么出峰时间整体都向后移了2-3min 而且峰型也变宽了。该怎么调节回来

HPLC对磺胺类药物的分析与检测
之前.jpg


HPLC对磺胺类药物的分析与检测-1
现在.jpg
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得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐。
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木子李li: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-10-30 14:55:35
个人怀疑是色谱柱的原因  建议用甲醇活化后再试试看会不会好点
3楼2015-10-28 17:38:17
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longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木子李li: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-10-30 14:55:09
木子李li: 金币+20 2015-10-30 14:57:07
应该是柱子坏了。因为从你的图里看出来,你的峰不是变宽了,而是已经有裂峰趋势了。
建议换个柱子试试看吧,然后把这个柱子好好冲冲
12楼2015-10-28 20:42:46
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 木子李li at 2015-10-28 18:32:23
可是柱子用过多次,而且也用100%的甲醇冲洗过,也倒冲过,情况还是这样
...

你看第三个峰 明显有点变形了 肯定没对 如果确定仪器没问题 那么多半就是柱子的原因了 要不换一支新柱子试试
14楼2015-10-28 21:30:47
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Echo285

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 木子李li at 2015-10-28 21:39:52
这些也都尝试过多次,应该都没问题
...

嗯 如果是新柱 保存清洁完好 没有磕碰 一个月的时间不会有问题吧 之前遇到过重现性不好的问题 但是是平衡时间问题 重新做了两针就好了 也有可能是不是有小气泡 感觉高效液相 会有很多原因引起这种问题呢 如果可以 不如重新制样 测两针

发自小木虫IOS客户端
23楼2015-10-29 00:16:03
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药王*思邈

铜虫 (小有名气)

方法中有没有对柱子对要求?比如在粒径上,或柱子的长短上

发自小木虫Android客户端
4楼2015-10-28 18:07:08
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木子李li

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2015-10-28 17:38:17
个人怀疑是色谱柱的原因  建议用甲醇活化后再试试看会不会好点

可是柱子用过多次,而且也用100%的甲醇冲洗过,也倒冲过,情况还是这样

发自小木虫Android客户端
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐。
5楼2015-10-28 18:32:23
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药王*思邈

铜虫 (小有名气)

7楼2015-10-28 18:35:36
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Echo285

新虫 (初入文坛)

如果其他条件没有变化 是不是和平衡时间有关?

发自小木虫IOS客户端
8楼2015-10-28 18:49:34
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

确认下,你两张图用的同一根柱子?分别是什么时候做的实验?
铁甲依然在
11楼2015-10-28 19:51:31
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201306068

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木子李li: 金币+5 2015-10-30 14:56:23
2-3min这完全在正常范围以内,可以试试先100%乙醇小流速冲一天,再90:10正己烷:异丙醇平衡一天
13楼2015-10-28 21:23:36
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Echo285

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 木子李li at 2015-10-28 19:47:55
每次都是基线平稳的时候再进行的测定,所以平衡时间应该不会有影响吧?...

那是不是进样系统的问题 或者样品的问题

发自小木虫IOS客户端
15楼2015-10-28 21:33:54
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吡啶二甲酸

禁虫 (职业作家)

本帖内容被屏蔽

25楼2015-10-29 05:54:00
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

引用回帖:
28楼: Originally posted by 木子李li at 2015-10-29 15:54:22
现在连续分析了几次,每次保留时间都跟图2大致相同、变化不大。另如果柱头有污染或者塌陷了只用100%的甲醇冲洗就可以吗?需要别的试剂吗?...

你先用甲醇冲洗一下试试看了,不行的话,可以换异丙醇试试
人生若只如初见...
34楼2015-10-30 09:22:01
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普通回帖

木子李li

木虫 (小有名气)

得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐。
2楼2015-10-28 15:52:57
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木子李li

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 药王*思邈 at 2015-10-28 18:07:08
方法中有没有对柱子对要求?比如在粒径上,或柱子的长短上

没有要求,现在使用的是C18 240×4.6的柱子,是柱子的问题麽

发自小木虫Android客户端
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐。
6楼2015-10-28 18:34:06
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木子李li

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Echo285 at 2015-10-28 18:49:34
如果其他条件没有变化 是不是和平衡时间有关?

每次都是基线平稳的时候再进行的测定,所以平衡时间应该不会有影响吧?
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐。
9楼2015-10-28 19:47:55
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木子李li

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 药王*思邈 at 2015-10-28 18:35:36
试试用短一点的,比如200的

请问下这是什么原理
得不到的永远在骚动,被偏爱的都有恃无恐。
10楼2015-10-28 19:50:15
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