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高山流水循

木虫 (小有名气)

[交流] 酵母菌落pcr 已有11人参与

酵母的菌落pcr老是P不出来,求解,试了好多办法。

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zergbloody

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲 需要提下基因组的 酵母不好裂解

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-10-28 01:42:51
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普通回帖

xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
菌体量用太多了吧,一般没什么问题的。
3楼2015-10-28 07:54:30
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酵母细胞很难破碎,想做菌落PCR至少得将其在液氮、100水浴中反复冻融好多次才有可能P出东西来
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
4楼2015-10-28 09:47:10
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redleaf16

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从引物,时间,温度上做尝试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
为了艺术,为了生活,为了艺术生活
5楼2015-10-28 12:54:53
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caichenggu

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我用的蜗牛酶消化,然后在100度煮上十分钟就能做模板了
6楼2015-10-28 13:39:33
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高山流水循

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by caichenggu at 2015-10-28 13:39:33
我用的蜗牛酶消化,然后在100度煮上十分钟就能做模板了

能具体点吗?蜗牛酶的用量多少?孵育多少时间?
7楼2015-10-29 14:24:33
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fanchuyao

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用碱裂解法处理
或者玻璃珠破碎法提基因组做模板
8楼2015-10-29 15:30:42
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vivd娟

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
必须先要裂解了之后才会有基因组。方法有很多,物理机械法,还有其他,试剂盒也可以,方便快捷
9楼2015-10-30 10:19:04
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥?


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不用裂解,你在平板上用牙签点一个菌落家到你的体系里去,然后pcr的启动时间设置94度15分钟就行了,我就这么做的
现在我们能做的就是努力努力再努力
10楼2015-10-30 10:38:51
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