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andy63050506

木虫 (正式写手)

[求助] 请高手指教:关于自己分离的单体,如何进行HPLC或者UPLC进行纯度检测 已有1人参与

各位高手请指教:
               自己从枳壳中分离出“水合橙皮内酯”这一单体,想通过液相检测其纯度,我查过一些资料,有人说“要选择5种不同的波长,将紫外扫描全覆盖,然后用三种不同流动相分析这个单体,然后用面积归一化方法就算纯度”
              各位大虾,我想问一下,UPLC或者HPLC检测单体纯度的时候,有没有官方的标准和方法或者SCI上有文献的能提供一篇作参考,万分感谢
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andy63050506

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by klicking at 2015-10-23 21:57:49
一般是通过HPLC-DAD峰纯度+峰面积归一化法计算纯度,当然通过三种不同流动相分析测定纯度是比较安全的,但那是建立在没有LC-MS的基础上的。
这个东东没有官方答案。
建议以HPLC-DAD峰纯度+峰面积归一化法计算纯度 ...

那就是还要将此单体作水分检查和炽灼残渣吗?请问残留溶剂怎么扣除。两种流动相的配比有没有什么要求?也需要用不同的色谱柱考察吗?
4楼2015-10-24 10:02:40
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jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析

先液相做二极管阵列DAD检测,看看纯度角是否小于纯度阈值,再做个核磁氢谱,质谱就能得到可靠的结论了。

发自小木虫Android客户端
2楼2015-10-23 21:16:37
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般是通过HPLC-DAD峰纯度+峰面积归一化法计算纯度,当然通过三种不同流动相分析测定纯度是比较安全的,但那是建立在没有LC-MS的基础上的。
这个东东没有官方答案。
建议以HPLC-DAD峰纯度+峰面积归一化法计算纯度,流动相两种就够了,注意扣除各波长下空白溶剂中的溶剂峰,例如我们的一个样品,用水和甲醇作为流动相,C18测定纯度为99.5,用SB-Aq色谱柱,0.1%TFA-甲醇测定时纯度为99.3%,同时两个条件下峰纯度均合格,即可计算纯度了,以较低的为准。
同时还要扣除水分,残留溶剂,炽灼残渣等,最终得到纯度。
归零
3楼2015-10-23 21:57:49
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by andy63050506 at 2015-10-24 10:02:40
那就是还要将此单体作水分检查和炽灼残渣吗?请问残留溶剂怎么扣除。两种流动相的配比有没有什么要求?也需要用不同的色谱柱考察吗?...

量够是要做水分和残渣以扣除水分和无机盐,残留溶剂通过GC来测定。流动相配比无固定要求,最好是换一根色谱柱,换个流动相配比,没有色谱柱的时候,换流动相配比就行了。
归零
5楼2015-10-24 18:49:57
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