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xieyanxia1994

金虫 (正式写手)

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[求助] 求助成纤维细胞胶原蛋白检测方法已有1人参与

如题，求助各位细胞内胶原蛋白检测定量方法

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1楼 2015-10-23 09:56:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

柳荫荫

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

天狼星红染色法测定胶原含量.
具体步骤为：去除96 孔板中的培养液, -20 ℃甲醇固定细胞过夜, PBS 洗1 遍;0.1 %天狼星红室温染色1h，去除染液，用0.1 %冰醋酸洗3 遍, 每次5min ；每孔加入0.1mol/L 氢氧化钠200μl ，室温作用1h ，振荡混匀，于540nm 测吸光。
参考文献：李亚东，牛建昭，王继峰等.循环纤维细胞和人胚肺成纤维细胞的比较研究[J] .解剖学报 , 2007 ,38 (3):301-303 .

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