24小时热门版块排行榜    

查看: 2560  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

三爷111

金虫 (小有名气)

[求助] 跪求Raw细胞转染方法,已然处于崩溃的边缘,求大神指点! 已有3人参与

有没有人做过Raw细胞转染啊?近两三个月了,一直卡在Raw细胞过表达实验上,没有一点进展。简直要崩溃了。尝试过换转染试剂,也各种摸索浓度条件,依然转染效率低于10%。最近刚换了罗氏的转染试剂X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent,昨天试了一次,效果依然不理想。不知道是怎么回事。我转染之前细胞密度在50%左右,说明书上写的是转染前细胞密度在70%-90%,想问下细胞密度对转染效率影响很大吗?有没有用过这款转染试剂在RAW细胞上转的同志啊?还请指点一二啊。或者有用其它方法转染在Raw细胞上转染质粒的同学,也请不吝赐教。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主可以看看siRNA设置梯度了吗?最好用带荧光的siRNA对照转转看是否转进去了,RAW264.7本来就不好转染,需要用专用转染试剂才可以,朋友给我推荐了RFect悬浮细胞专用小核酸转染试剂,我用在thp-1细胞上做到70%的转染效率,可能条件需要在优化一下就更好了。
5楼2018-11-14 11:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
三爷111: 金币+5 2015-10-24 10:08:26
如果阳性对照也发现该细胞试剂转染效率很低的话,建议做电转
医学&统计学
2楼2015-10-22 14:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyan1993

新虫 (初入文坛)

细胞密度低是转不进去  建议密度高点
3楼2015-10-22 18:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcree

新虫 (初入文坛)

看楼主用的是罗氏的转染试剂,我们之前也用过,但是实验结果不理想。后来换了RFect小核酸转染试剂,做下来结果还可以。操作也挺方便的,你可以试试。
4楼2018-10-08 11:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料292调剂 +6 橘颂思美人 2026-03-23 6/300 2026-03-24 13:32 by 连洋洋洋
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +9 纸鱼ly 2026-03-21 10/500 2026-03-24 11:36 by 544594351
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 招08考数学 +6 laoshidan 2026-03-20 14/700 2026-03-23 14:37 by 15614359529
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见