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包包娃

新虫 (小有名气)

[求助] HUVEC 的SEM图片问题已有1人参与

我养的是HUVEC,细胞种在孔板里面的时候,连续几天,培养基都是澄清的,但细胞贴附后,铺展状态不是很好,而且细胞明显没有增殖的迹象这是我第3天的细胞形态,SEM图片看到,细胞上面像是覆盖着一层什么东西一样,特别想知道这到底是什么东西,是染菌了还是怎么了,而且那个小冰晶一样的东西是什么呢?求大神指导!!!!固定用的2.5%的戊二醛

HUVEC 的SEM图片问题
c1-1000-1.jpg
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Gentle_雄雄

木虫 (小有名气)

看着像大肠杆菌,有没有放大的图?

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Nopains,nogains!
2楼2015-10-21 07:45:45
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包包娃

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Gentle_雄雄 at 2015-10-21 07:45:45
看着像大肠杆菌,有没有放大的图?

谢谢你的回复,这张就能清晰地看出杆状的东西,细胞上面的那层东西是不是也是因为染菌引起的呢?那个小冰晶一样的东西是什么呢?我想解决了这些问题,下次拍电镜的时候能得到漂亮的图片!
HUVEC 的SEM图片问题-1



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3楼2015-10-21 07:52:59
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Gentle_雄雄

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 包包娃 at 2015-10-21 07:52:59
谢谢你的回复,这张就能清晰地看出杆状的东西,细胞上面的那层东西是不是也是因为染菌引起的呢?那个小冰晶一样的东西是什么呢?我想解决了这些问题,下次拍电镜的时候能得到漂亮的图片!

...

看着有点像杆菌(大肠杆菌一般在2-5μm左右。)
冰晶状物质,可能是细胞脱水过程中留下的盐晶。梯度脱水时,每一浓度都要浸泡足够长时间,特别是纯乙醇,适当增多梯度。

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Nopains,nogains!
4楼2015-10-21 09:46:04
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包包娃

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Gentle_雄雄 at 2015-10-21 09:46:04
看着有点像杆菌(大肠杆菌一般在2-5μm左右。)
冰晶状物质,可能是细胞脱水过程中留下的盐晶。梯度脱水时,每一浓度都要浸泡足够长时间,特别是纯乙醇,适当增多梯度。
...

嗯,跪谢!我用了6个梯度,各脱水10min,下次改用15min,乙醇的量稍微增加些

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5楼2015-10-21 10:54:17
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Gentle_雄雄

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 包包娃 at 2015-10-21 10:54:17
嗯,跪谢!我用了6个梯度,各脱水10min,下次改用15min,乙醇的量稍微增加些
...

可以的。祝成功。

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Nopains,nogains!
6楼2015-10-22 10:10:18
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catechol

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
包包娃: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-10-23 21:48:46
看着像是染菌了
另外种HUVEC之前,用collagen A处理下板子,效果会更好
7楼2015-10-23 21:00:02
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包包娃

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by catechol at 2015-10-23 21:00:02
看着像是染菌了
另外种HUVEC之前,用collagen A处理下板子,效果会更好

嗯,就是染菌了,你说用胶原处理板,具体怎么处理,可否详细介绍一下?本人养HUVEC已经三个月了,在培养瓶里面好好的,一种到板上就出问题,都快头疼死了,求指点啊~

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8楼2015-10-23 21:53:14
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