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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 能用HPLC方法鉴定短肽吗？
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bb123456789

金虫 (正式写手)

[求助] 能用HPLC方法鉴定短肽吗？ 已有2人参与

各位亲，请了解HPLC的亲帮忙分析一下，看以下实验设计方案能用HPLC方法完成吗？

之前，外源表达一个水解酶，已验证有活性。查阅文献，在其它物种中同源蛋白可以降解一个10肽，生成一个7肽和3肽。现在我也想验证一下，外源表达的这个蛋白是否能水解这个10肽，想通过HPLC鉴定产物，不知道行不行呢？如果可以，我在制备样品时应该注意什么呢？

在此，先谢谢各位大神！
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1楼 2015-10-19 22:01:26
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mao877516786 at 2015-10-20 10:40:50
个人想法，如果是我做这个实验可能是这样的分别用液相色谱分析原肽、蛋白酶液和酶解液体，比对这三者之间多出的目标峰，然后收集多出的色谱峰进行质谱和测序确认，但在此之前需要根据序列预测你的色谱条件从而选择你 ...

高手！
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5楼2015-10-21 11:28:44
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bb123456789: 金币+2, ★★★很有帮助, 对HPLC不了解，所以比较困惑。 2015-10-20 10:32:14
10肽的话 应该可以 建议楼主使用文献中相似的色谱柱 另外 就算得到肽图 您又如何比较其异同呢？
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-19 22:16:57
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jimmyrice

金虫 (小有名气)
archbishop: 屏蔽内容 2015-10-20 18:06:54
本帖内容被屏蔽
3楼2015-10-20 10:09:29
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mao877516786

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bb123456789: 金币+5, ★★★很有帮助, 嗯 这给我了很大的启发 2015-11-02 20:44:24
个人想法，如果是我做这个实验可能是这样的分别用液相色谱分析原肽、蛋白酶液和酶解液体，比对这三者之间多出的目标峰，然后收集多出的色谱峰进行质谱和测序确认，但在此之前需要根据序列预测你的色谱条件从而选择你的比较好的测定条件。诸如的肽可能疏水性很强，或者紫外吸收很低，这些尽可能考虑到。。。。
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4楼2015-10-20 10:40:50
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