| 查看: 4549 | 回复: 3 | ||
[求助]
---为什么的WB条带是这样？求各位大神指点！！！！！
|
 大家帮我看看，为什么我的条带是这样的。总共上传了三次WB结果，三次实验条件基本相同（其中第二次内参一抗为1:1000，第三次内参一抗1:500）。简单说一下我的实验条件:1、电泳：上样量25ul，其他的我都是看电泳跑得到底就停下了。 2、转膜：50mA，25min;（内参和目的蛋白分子量只差几KDa，用一样的转膜条件）; 2、封闭：37°摇床（150r/min）封闭3h； 3、一抗：1:1000（目的蛋白），1:500（内参），4度冰箱孵育过夜，TBST洗三次，每次10min； 4、二抗：1:1000,37°摇床（150r/min）孵育2h，TBST洗三次，每次10min，再TBS洗2次，每次5min； 5、曝光 备注：封闭时间二抗浓度、内参浓度是实验室摸索好的。 请各位大神、以及有相同经验的亲们指点，谢谢啦~  第一次（目的蛋白1）.jpg  第二次（内参）.jpg  第三次（内参）.jpg  第三次（目的蛋白1）.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有251人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2015-10-19 08:06:55
3楼2015-10-19 09:43:01
4楼2015-10-19 11:37:53
