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急，之前提质粒浓度正常，这段时间提出来浓度都很低为什么 已有8人参与
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 已经将我的目地基因导入T载，提质粒进行后续实验，之前提的质粒都有200ng/ul左右，最近两次所提出的质粒浓度很低，只有50ng/ul。质粒提取试剂盒肯定没问题，因为实验室其他同学也在做，都正常 之前几次和现在的区别就是我从同一个平板的不同区域挑的菌，这个菌都是来自同一根液体LB试管（难道当时我从液体接到平板的时候就挑了不同质粒拷贝数的菌液？）然后提出来浓度有200左右的菌平板上已经被我刮得很干净了，所以我换了另一个区域刮（总共四个区域），有没有可能是amp失效了，所以质粒丢失，那么我现在想到两个方法： 1.从原来那个刮完的平板上再刮菌转接平板，但如果是amp失效的情况下，那这个区域的菌质粒是不是也会丢失，如果是，那这个方法应该不能提高质粒浓度 2我当时提过一次原来区域菌的质粒，测了浓度有170多ng/ul，用了一部分，还有几ul。那我将质粒重新转化DH5a，会改善这个情况么？？？ 两个方法哪个更有效？ |
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【答案】应助回帖
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确定质粒是你预设的（酶切，测序），剩下才是酶切所用质粒量的问题，多提几支即可，若想要质粒浓度高些的，可几管合并到一个吸附柱上，或含质粒的洗脱液再用于洗脱另一个吸附柱，或者洗脱后浓缩。质粒量是个小问题，酶切，回收，连接，转化，比较容易出问题。但质粒是源头，要保质保量。 发自小木虫Android客户端 |
23楼2015-10-18 16:05:14
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小小八八: 金币+2, ★有帮助 2015-10-16 12:04:02
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2楼2015-10-16 11:53:08
3楼2015-10-16 12:03:48
4楼2015-10-16 12:05:43
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