应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 急，之前提质粒浓度正常，这段时间提出来浓度都很低为什么
52/1返回列表
查看: 5876  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急，之前提质粒浓度正常，这段时间提出来浓度都很低为什么 已有8人参与

已经将我的目地基因导入T载，提质粒进行后续实验，之前提的质粒都有200ng/ul左右，最近两次所提出的质粒浓度很低，只有50ng/ul。
质粒提取试剂盒肯定没问题，因为实验室其他同学也在做，都正常
之前几次和现在的区别就是我从同一个平板的不同区域挑的菌，这个菌都是来自同一根液体LB试管（难道当时我从液体接到平板的时候就挑了不同质粒拷贝数的菌液？）然后提出来浓度有200左右的菌平板上已经被我刮得很干净了，所以我换了另一个区域刮（总共四个区域），有没有可能是amp失效了，所以质粒丢失，那么我现在想到两个方法：
1.从原来那个刮完的平板上再刮菌转接平板，但如果是amp失效的情况下，那这个区域的菌质粒是不是也会丢失，如果是，那这个方法应该不能提高质粒浓度
2我当时提过一次原来区域菌的质粒，测了浓度有170多ng/ul，用了一部分，还有几ul。那我将质粒重新转化DH5a，会改善这个情况么？？？ 两个方法哪个更有效？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-10-16 11:39:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tolobio

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小小八八: 金币+2, ★有帮助 2015-10-16 15:43:22
引用回帖:
10楼: Originally posted by 小小八八 at 2015-10-16 14:39:41
菌有问题是指质粒丢失吗？那我把提出来的质粒重新转化一次可以解决这个问题吗...

重新转化一下即可。试试吧，应该没问题的。
赞一下 回复此楼
12楼2015-10-16 15:29:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

Eternity宇

禁虫 (著名写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小小八八: 金币+2, ★有帮助 2015-10-16 12:04:02
本帖内容被屏蔽
2楼2015-10-16 11:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Eternity宇 at 2015-10-16 11:53:08
重新转的话比较稳妥一点儿，因为不知道你摇菌的时间和Amp加的量所以不太敢确定是不是摇的问题……

都是过夜摇菌，amp终浓度都是一样的，我提质粒提了很多次了，操作都是一样的，应该不是摇菌的问题，那我重新转化的话我的质粒浓度能提高回来吗？好怕质粒浓度就上不去了那我后面酶切连接都没法做了，已经做了4个月酶切连接，一点进展都没有，这几次提质粒发现质粒浓度都上不去
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-16 12:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小八八

铁虫 (初入文坛)
还想问一下，我如果用提出来的浓度50多的质粒还是说要用浓度170多的质粒重新转化的话我的质粒浓度能提高回来吗？哪个效果更好？好怕质粒浓度就上不去了那我后面酶切连接都没法做了，已经做了4个月酶切连接，一点进展都没有，这几次提质粒发现质粒浓度都上不去
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-16 12:05:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:22 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 02:09 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:45 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:25 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-30 00:59 by winsaint
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭